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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907操作步驟

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更新時(shí)間:2017-05-16 17:03:39瀏覽次數(shù):207次

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

細(xì)胞名稱(chēng)      EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907操作步驟
形態(tài)特性       淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性      懸浮生長(zhǎng)
特征特性       該細(xì)胞系來(lái)源于一無(wú)精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件       RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法       1:2傳代;5-6天一次
傳代情況      P2
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)      熒光法(-)
STR       -
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      A類(lèi) 
 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿(mǎn),光澤度好,*,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶(hù)
 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
 鈣激活中性蛋白酶6(CAPN6)ELISA試劑盒    ,英文名:    CAPN6 ELISA Kit
鈣激活中性蛋白酶1(CAPN1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CAPN1 ELISA Kit
鈣蛋白酶抑制蛋白(T)ELISA試劑盒    ,英文名:    T ELISA Kit
鈣蛋白酶抑素抗體(AT-DⅣ)ELISA試劑盒    ,英文名:    AT-DⅣ ELISA Kit
鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)ELISA試劑盒    ,英文名:    CAPN2 ELISA Kit
鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒    ,英文名:    CAMK 2 ELISA Kit
富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒    ,英文名:    HTN5 ELISA Kit
富組蛋白(histatin-5)ELISA試劑盒    ,英文名:    histatin-5 ELISA Kit
富組氨酸糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒    ,英文名:    HRG ELISA Kit
富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒    ,英文名:    LRG1 ELISA Kit
富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)ELISA試劑盒    ,英文名:    Cyr61/CCN1 ELISA Kit
復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒    ,英文名:    RPA-70 ELISA Kit
復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒    ,英文名:    CPSA ELISA Kit

小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒    Mouse Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit
小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)免疫試劑盒    Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫試劑盒    Mouse Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶10(P-10)免疫試劑盒    Mouse Caspase-10,P10 ELISA kit
小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒    Mouse osteonectin,ON ELISA Kit
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒    Mouse Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit
小鼠骨形成蛋白(BMPs)免疫試劑盒    Mouse bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit
小鼠骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒    Mouse Bone sialoprotein,BSP ELISA kit
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)免疫試劑盒    Mouse Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit
 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907操作步驟小鼠骨特性堿性磷酸酶C端肽免疫試劑盒    Mouse C-terminal peptide of bone-specific alkaline phosphatase ELISA kit
小鼠骨特性堿性磷酸酶(BALP)免疫試劑盒    Mouse Bone-specific alkaline phosphatase,BALP ELISA kit
小鼠骨橋素(OPN)免疫試劑盒    Mouse Osteopontin,OPN ELISA Kit

 

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