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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927操作步驟

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更新時間:2017-05-16 17:00:26瀏覽次數(shù):172次

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
細(xì)胞名稱      EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927操作步驟
形態(tài)特性       淋巴母細(xì)胞樣
生長特性      懸浮生長
特征特性       該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件       RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法       1:2傳代;5-6天一次
傳代情況      P2
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      熒光法(-)
STR       -
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      A類  
 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927操作步驟復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒    ,英文名:    CK-HMW ELISA Kit
高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒    ,英文名:    AGAA ELISA Kit
高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒    ,英文名:    GP-73 ELISA Kit
高半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒    ,英文名:    Hcy ELISA Kit
剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA試劑盒    ,英文名:    T.gondii ELISA Kit
干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒    ,英文名:    SCFR ELISA Kit
干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒    ,英文名:    SCF/MGF ELISA Kit
干細(xì)胞生長因子(SCF)ELISA試劑盒    ,英文名:    SCF ELISA Kit
干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)ELISA試劑盒    ,英文名:    IFITM1/CD225/IFI17 ELISA Kit
干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒    ,英文名:    IP-10/CXCL10 ELISA Kit
干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒    ,英文名:    ITAC/CXCL11 ELISA Kit
干擾素調(diào)節(jié)因子8(IRF8)ELISA試劑盒    ,英文名:    IRF8 ELISA Kit
干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒    ,英文名:    IRF3 ELISA Kit

小鼠甲基化酶(Methylase)免疫試劑盒    Mouse Methylase ELISA Kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A(MMP2/Gel A)antibody ELISA kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)免疫試劑盒    Mouse matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit
小鼠基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)免疫試劑盒    Mouse Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit
 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927操作步驟小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)免疫試劑盒    Mouse Creatine Kinase MM isoenzyme,CK-MM ELISA Kit
小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)免疫試劑盒    Mouse Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
小鼠肌酸激酶(CK)免疫試劑盒    Mouse Creatine Kinase,CK ELISA Kit
小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)免疫試劑盒    Mouse myosin heavy chain,MHC ELISA Kit

 

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