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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0923實(shí)驗(yàn)方法
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0928操作步驟
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0926培養(yǎng)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-01說(shuō)明書(shū)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞名稱(chēng) SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織,建立了此細(xì)胞系。 在許可溫度33.5oC下細(xì)胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細(xì)胞極少分裂或不分裂。 這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。 這些細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化,造骨細(xì)胞激素,生長(zhǎng)因子,和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.3mg/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿(mǎn),光澤度好,*,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶(hù)!
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒 Mouse Plaet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit
小鼠血小板生成素(TPO)免疫試劑盒 Mouse Thrombopoietin,TPO ELISA kit
小鼠血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒 Mouse plaet activating factor,PAF ELISA KIT
小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒 Mouse thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit
小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 Mouse Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit
小鼠血纖蛋白原γ鏈(FGG)免疫試劑盒 Mouse Fibrinogen Gamma Chain,F(xiàn)GG ELISA Kit
小鼠血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒 Mouse Fibrinogen,Fbg ELISA Kit
小鼠血纖蛋白(fibrin)免疫試劑盒 Mouse fibrin ELISA kit
小鼠血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒 Mouse Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
小鼠血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒 Mouse Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
小鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒 Mouse thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
小鼠血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)免疫試劑盒 Mouse serum amyloid A-3 protein,SAA3 ELISA kit
小鼠血漿激肽釋放酶(KLKB1)免疫試劑盒 Mouse plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit
人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ,英文名: EMAb ELISA Kit
人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒 ,英文名: PA-IgM ELISA Kit
人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 ,英文名: PA-IgG/M/A ELISA Kit
人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: PA-IgG ELISA Kit
人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 ,英文名: cmDNA ELISA Kit
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒 ,英文名: AGPA/PCA ELISA Kit
人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒 ,英文名: ARA ELISA Kit
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 ,英文名: SDA ELISA Kit
人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: DNP-Ab ELISA Kit
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒 ,英文名: PsmAb ELISA Kit
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 ,英文名: MCV ELISA Kit
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-MCV Ab ELISA Kit
人抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 ,英文名: aZP ELISA Kit
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