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人胚肺二倍體細胞;2BS操作步驟

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更新時間:2017-05-16 14:43:21瀏覽次數(shù):312次

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人胚肺二倍體細胞;2BS操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細胞名稱      人胚肺二倍體細胞;2BS操作步驟
形態(tài)特性       成纖維細胞樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       人胚肺二倍體細胞,來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株 
培養(yǎng)條件       MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%
傳代方法       1:2-1:4
傳代情況      P21
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      培養(yǎng)法(-)
STR       Amelogenin:X; D7S820:8,11;CSF1PO:10,12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:14,17;D21S11:29,30;D3S1358:15;D5S818:11;D8S1179:11,13;FGA:19,22;PentaD:11,13;PentaE:7,11;TH01:7,9;TPOX:8,10;vWA:18
同工酶      人B,NP,G7PG,MD,AST
染色體      
使用權(quán)限      A類 
人胚肺二倍體細胞;2BS操作步驟復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人胚肺二倍體細胞;2BS操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應(yīng), 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒    ,英文名:    NADPH ELISA Kit
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)ELISA試劑盒    ,英文名:    NAD ELISA Kit
牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CEMP-1 ELISA Kit
牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    DMP1 ELISA Kit
循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒    ,英文名:    CIC ELISA Kit
血影蛋白(spectrin)ELISA試劑盒    ,英文名:    spectrin ELISA Kit
血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDGFsR-α ELISA Kit
血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDGF-AB ELISA Kit
血小板源性生長因子D(PDGF-D)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDGF-D ELISA Kit
血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒    ,英文名:    PF-4/CXCL4 ELISA Kit
血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒    ,英文名:    PF4 ELISA Kit
血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒    ,英文名:    PF-3 ELISA Kit
血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDGF-CC ELISA Kit
血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDGF-BB ELISA Kit

蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    Bufarenogin    沙蟾毒精    17008-69-4    C24H32O7    ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    Cinobufagin    華蟾酥毒基    470-37-1    C26H34O6    ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    Cinobufotalin    華蟾毒它靈    1108-68-5    C26H34O7    ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    Gamabufotalin    日蟾蜍他靈    465-11-2     C24H34O5    ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    Resibufogenin    酯蟾毒配基    465-39-4    C24H32O4    ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    ocinobufagin    遠華蟾蜍精    472-26-4    C24H34O5    ≥98%
潺槁木姜子Litsea glutinosa    Boldine    波爾定堿    476-70-0    C19H21NO4    ≥98%
潺槁木姜子Litsea glutinosa    Brevilin A    短葉老鶴草素 A    16503-32-5    C20H26O5    ≥90%
人胚肺二倍體細胞;2BS操作步驟潺槁木姜子Litsea glutinosa    Litseglutine B    N-甲基-O10-甲基蓮葉桐文    25368-01-8    C20H23NO4    ≥96%
潺槁木姜子Litsea glutinosa    Lycoclavanol    石松醇    13956-51-9    C30H50O3    ≥98.5%

 

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