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人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC實(shí)驗(yàn)方法
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN操作步驟
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC培養(yǎng)
細(xì)胞名稱 人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2說明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:9,11;D16S539:11,13;D18S51:12,13;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:17,23;D3S1358:16;D5S818:9,11;D7S820:10,12;D8S1179:10,13;FGA:21,25;TH01:7,9;TPOX:8,11;vWA:14,16;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2說明書復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2說明書細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
大青葉Polygonum tinctorium Ait Indigo 靛藍(lán) 482-89-3 C16H10N2O2 ≥98%
大麥芽Hordeum vulgare L Hordenine 大麥芽堿 539-15-1 C10H15NO ≥98%
Cannabis sativa β-Amyrin acetate β-香樹脂醇乙酸酯 1616-93-9 C32H52O2 ≥97%
Cannabis sativa Cannabichromene 色原烯 20675-51-8 C21H30O2 ≥98%
Cannabis sativa Cannabidiol 二酚 13956-29-1 C21H30O2 ≥97%
Cannabis sativa Cannabidiolic acid 二醇酸 1244-58-2 C22H30O4 ≥95%
Cannabis sativa Cannabigerol 萜酚 25654-31-3 C21H32O2 ≥90%
Cannabis sativa Cannabispiran 2',3'-二氫-7'-羥基-5'-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,1'-[1H]茚]-4-酮 61262-81-5 C15H18O3 ≥98%
Cannabis sativa Cannabispirol 螺醇 64052-90-0 C15H20O3 ≥95%
Cannabis sativa Canniprene 烯 70677-47-3 C21H26O4 ≥98%
Cannabis sativa α-Cannabispiranol 反式-2',3'-二氫-5'-甲氧基螺[環(huán)己烷-1,1'-[1H]茚]-4,7'-二醇 69636-83-5 C15H20O3 ≥95%
Cannabis sativa Epicannabidiol hydrate 表二醇水合物 139561-95-8 C21H32O3 ≥98%
大金牛草Polygala chinensis Kaempeerol-3-O- glucorhamnoside 阿福豆苷 40437-72-7 C27H30O15 ≥98%
PACSIN3 胞漿蛋白PACSIN3抗體
PAG1 跨膜接頭蛋白PAG抗體
PARD6G PARD6G蛋白抗體
PL6 胎盤蛋白6抗體
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子抗體
Pepsinogen II 胃蛋白酶原C抗體
phospho-PRKD1 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體
Profilin 1 前纖維蛋白1抗體
PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原抗體抗體
phospho-FAK 磷酸化粘著斑激酶抗體
phospho-PTK2 磷酸化粘著斑激酶抗體
phospho-PAK1 磷酸化p21激活激酶1抗體
Phospho-PDPK1 磷酸化3磷酸肌醇依賴蛋白激酶1抗體
Phospho-PDPK1 磷酸化3磷酸肌醇依賴蛋白激酶1抗體
人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2說明書Phospho-PDPK1 磷酸化3磷酸肌醇依賴蛋白激酶1抗體
Phospho-PLC gamma 1 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
Phospho-PLC gamma 2 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體
Phospho-Paxillin 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
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