原代細胞一種新型的熒光生物傳感器可以觀察到在活細胞中高度特異性位置發(fā)生的酶和細胞信號傳導(dǎo)活性。

這些活動的發(fā)生通常在100納米大小，觀察它們目前是困難或不可能的。例如，可見光的衍射極限會阻止光學(xué)顯微鏡在小于200至250nm的位置捕獲動態(tài)事件。

超分辨率技術(shù)如SOFI突破了光學(xué)顯微鏡的衍射極限。但是，它們只能對細胞中的靜態(tài)結(jié)構(gòu)進行成像，而不是動態(tài)生物活性。

加利福尼亞大學(xué)圣地亞哥分校的Jin Zhang和同事已經(jīng)開發(fā)出了一種以新的方式照亮細胞過程的生物傳感器，可與SOFI的分辨率匹配，達到約100nm的分辨率。

他們發(fā)現(xiàn)一種新的生物傳感現(xiàn)象稱為FLINC-接觸增加熒光誘導(dǎo)，當(dāng)兩種熒光蛋白緊密接觸時，熒光波動加快。 FRET（(fluorescence resonance energy transfer）和BiFC（bimolecular fluorescence complementation）有機會引發(fā)FLINC。但是FRET不能與超分辨率成像兼容，BiFC是一次不可逆的熒光生成過程，無法跟蹤動態(tài)生物活性。

Zhang和同事偶然發(fā)現(xiàn)，當(dāng)兩者接近時，熒光蛋白Dronpa顯著增加另一種蛋白質(zhì)TagRFP-T的熒光波動率。該團隊創(chuàng)建了生物傳感器，這些蛋白質(zhì)放置在酶或信號分子中可以識別和修飾肽序列的兩端。通常，生物傳感器具有延伸的構(gòu)象，原代細胞其中兩種蛋白質(zhì)距離很遠。但是當(dāng)酶修飾肽序列時，例如，通過磷酸化-生物傳感器變成緊湊的形狀，這使蛋白質(zhì)接近并打開可以成像的FLINC信號。張和同事使用SOFI的生物傳感器在超分辨率下實現(xiàn)了可視化細胞微區(qū)域中的激酶活性。
250    EB Enrichment Broth    用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）    EB增菌液
250    LPM Agar    用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)（FDA標(biāo)準(zhǔn)）    LPM瓊脂
250    Modified Mcbride Agar Base    用于單增李氏菌選擇性分離（SN標(biāo)準(zhǔn)）    李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA)  
250    PALCAM Agar    用于單增李氏菌選擇性分離    PALCAM 瓊脂
250    Modified Buffered Peptone Water    用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)    改良緩沖蛋白胨水(MBP)
250    Oxford Agar Base    用于單增李氏菌的選擇性分離    牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)   
250    Trypticase Soy-Yeast Extract Agar    用于單增李氏菌的分純，培養(yǎng)，可用于做7%羊血瓊脂（SN標(biāo)準(zhǔn)）    胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)  
原代細胞