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原代細(xì)胞被菌種污染后的補救方法

時間:2017-10-20閱讀:289
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實驗室常見的原代細(xì)胞污染通常是細(xì)菌以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌多見,以及霉菌,黑蛟蟲,支原體和真菌。其中真菌Z難發(fā)現(xiàn)污染,也Z難處理,而霉菌和支原體等不是雙抗能解決的。

小編曾經(jīng)遇到貼壁細(xì)胞污染,經(jīng)病原微生物的老師鑒定是金葡菌污染所致,處理方法和樓主大同小異,但相對簡便,Z后把從ATCC購買的原代細(xì)胞救過來了。

小編簡單把自己的操作步驟整理下,分享給大家:

1.倒掉培養(yǎng)液,用火烤瓶口和瓶蓋大約1分鐘

2.用大量的PBS反復(fù)沖洗,每次約30ML,重復(fù)5次

注意:在用火烤瓶口和瓶蓋(如果是一次性培養(yǎng)瓶 時間不能太長,以免軟化變性)

3.加入5ML雙抗,37度,5分鐘

注意:PBS沖洗兩次

4.加入雙抗2ML,室溫5分鐘

注意:PBS沖洗兩次

5.加入培養(yǎng)液10ml 雙抗2ML 6小時后換液

6.重新加入培養(yǎng)液雙抗?jié)舛入S污染情況調(diào)整,連續(xù)5-7天

7.對于培養(yǎng)箱需要*全面消毒

8.碘伏消毒作用10分后酒精消毒10分鐘,重復(fù)兩次

9.紫外照射一小時

污染的原代細(xì)胞因為是原代,根本沒有凍存,上述方法處理后傳到第3代,在后來的激光共聚焦顯微鏡檢測沒有見到細(xì)胞形態(tài)異常。
供前列地爾    見標(biāo)示量    前列腺素A1    -20℃,避光    *:    規(guī)格:
供前列地爾    見標(biāo)示量    前列腺素B1    -20℃,避光    *:    規(guī)格:
供鮭降鈣素    2mg    N-乙酰-半胱氨酸1-鮭降鈣素    密封,4℃保存    *:    規(guī)格:
供醋酸奧曲肽    2mg    脫蘇氨醇8奧曲肽    密封,4℃保存    *:    規(guī)格:
    553/380fmol    游離甲狀腺素        *:    規(guī)格:
    552/362fmol    游離三碘甲狀腺原氨酸        *:    規(guī)格:
效價測定    約2.5g    洋地黃    2-8℃,避光    *:    規(guī)格:
效價測定    約30mg    垂體后葉    2-8℃,避光    *:    規(guī)格:
效價測定    20mg/支    胰島素(豬)    -20℃,避光    *:    規(guī)格:
原代細(xì)胞

 

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