固定透化處理原代細(xì)胞進(jìn)行成像優(yōu)劣勢(shì)
優(yōu)勢(shì)：細(xì)胞狀態(tài)保留在某個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)，細(xì)胞變得通透可允許大分子進(jìn)入，可以保護(hù)并穩(wěn)定總的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，靶標(biāo)不會(huì)移動(dòng)，更易于成像
劣勢(shì)：由于固定處理，蛋白構(gòu)造可能發(fā)生變化；大多數(shù)酶都已失活；細(xì)胞內(nèi)的可溶性成分可能會(huì)丟失；動(dòng)態(tài)過(guò)程可以提供更多的功能信息
固定
固定就是保持抗原細(xì)胞和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)固定不動(dòng)，同時(shí)又能使抗體進(jìn)入到細(xì)胞和亞細(xì)胞的所有部位。

固定時(shí)可使用一些交聯(lián)試劑，如多聚甲醛，有利于保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)。其通過(guò)與毗鄰的蛋白質(zhì)等大分子化學(xué)結(jié)合到一起，起到固定作用，這一過(guò)程被稱為交聯(lián)，但是可能會(huì)降低一些細(xì)胞成分的抗原性，因?yàn)榻宦?lián)阻礙了抗體結(jié)合。鑒于此，可采用抗原修復(fù)技術(shù)，尤其是固定孵育時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)或使用高百分比的交聯(lián)度固定劑時(shí)。
另外一種選擇就是使用有機(jī)溶劑如乙醇、甲醇、丙酮，但是它們會(huì)吸去脂類使細(xì)胞脫水，同時(shí)會(huì)使蛋白沉淀在細(xì)胞架上。其中甲醇、丙酮既具有固定作用，也可以通透。但是有些抗原表位對(duì)甲醇特別敏感，能破壞其抗原表位的結(jié)構(gòu)，所以如果檢測(cè)原代細(xì)胞內(nèi)的蛋白，需要通透處理，此時(shí)可以選擇丙酮替代。由于乙醇沒(méi)有通透作用，對(duì)于膜表面的抗原，此時(shí)可以選擇冷乙醇固定處理。
通透
通透步驟將會(huì)去除細(xì)胞膜脂質(zhì)體，從而允許抗體等較大的分子進(jìn)入到原代細(xì)胞內(nèi)部，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)抗原必須經(jīng)過(guò)此處理。

0.1–0.5%（體積比，溶解在PBS內(nèi)）的Triton® X-100和NP-40為常用的透化洗滌劑。透化時(shí)間10-15min是較好的起始點(diǎn)，但如果這種處理不太適合您的靶標(biāo)，則可能需要嘗試縮短時(shí)間或使用其他洗滌劑。此類除垢劑還可以透過(guò)細(xì)胞核膜，因此適于各種靶標(biāo)位置。
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD304/Neuropilin-1  神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體     0.1ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31(PECAM-1)/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31(PECAM-1)/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31(PECAM-1)/PE  熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31(PECAM-1)/PE  熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml
規(guī)格：    Multi-class antibodies    Anti-CD31/FITC  熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG     0.2ml原代細(xì)胞