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細胞共培養(yǎng)操作

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人正常組織細胞共培養(yǎng)
共培養(yǎng)是通過分別在小室內(nèi)外培養(yǎng)兩種或以上細胞,來研究細胞之間的相互作用,例如不同CD亞型的免疫細胞、免疫細胞和腫瘤細胞、飼養(yǎng)層和干細胞等。因此,在免疫、腫瘤、干細胞等領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用。細胞共培養(yǎng)分為幾個類型:一種是在膜的上下側(cè)分別培養(yǎng)兩種細胞,一種是在小室和培養(yǎng)板孔里分別培養(yǎng)細胞。
如何開展
方法一:
1.將小室放在24孔板里,用培養(yǎng)基潤濕膜。
2.反轉(zhuǎn)小室,底面朝上,加入約200μL細胞懸液,置于37℃細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)1-4小時,使細胞貼膜。
3.輕輕將小室正立在培養(yǎng)板孔里,在小室里層種第二種細胞,并在小室里面和外面都加培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)至細胞貼膜。
4. 依照實驗?zāi)康募尤敫鞣N刺激或者繼續(xù)培養(yǎng)細胞。

方法二:
1. 將小室正放在24孔板里,先在小室里面鋪一種細胞,在細胞培養(yǎng)箱里面培養(yǎng)至細胞貼膜。
2.反轉(zhuǎn)小室,底面朝上,置于一個新的培養(yǎng)皿上,鋪第二種細胞,體積稍微小一點(100-200uL,以24孔小室為例),培養(yǎng)1-4小時使細胞貼膜。
3.Z后再輕輕將小室正立在24孔板里,繼續(xù)培養(yǎng)細胞或者加入刺激。
小貼士
反面種人正常組織細胞時注意不要使培養(yǎng)基干掉,否則會影響細胞貼壁和存活
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