丙酮酸脫羧酶(PDC)測試盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到
100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人乳腺癌細胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人乳腺癌細胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細胞
Saos-2,人成骨肉瘤細胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細胞
EC109,人食管癌細胞
HGC-27人胃癌細胞
AGS人胃腺癌細胞
U251人膠質(zhì)瘤細胞
THP-1人單核白血病細胞
HuH-7人肝癌細胞
RBE, 人肝膽管癌細胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞
QGY-7701, 人肝癌細胞
PANC-1, 人胰腺癌細胞
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞
Hep G2, 人肝癌細胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞
QBC-939, 人膽管癌細胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞
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