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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>大鼠elisa試劑盒方法之優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)
大鼠elisa試劑盒可分為多種類型測(cè)定,是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。 我公司技術(shù)部將各種ELISA試劑盒常用方法的優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)進(jìn)行對(duì)比,結(jié)果如下:
一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)短,因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
劣勢(shì):試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費(fèi)用相對(duì)提高。
二、間接法:此測(cè)定方法與直接法類似,ELISA試劑盒差別在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。
優(yōu)勢(shì):二抗可以加強(qiáng)信號(hào),而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它Z多的免疫反應(yīng)性。
劣勢(shì):交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。
三、雙抗體夾心法:被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量;或不標(biāo)記,再透過(guò)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。
優(yōu)勢(shì):高靈敏、高專一性,抗原無(wú)須事先純化。
劣勢(shì):抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
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