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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>兩條降解原代細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)途徑
原代細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)主要有兩條降解途徑:即蛋白酶體系統(tǒng)降解及自噬系統(tǒng)降解。蛋白酶體系統(tǒng)主要降解細(xì)胞內(nèi)的短壽命蛋白,而自噬則負(fù)責(zé)長(zhǎng)壽命蛋白和部分細(xì)胞器的降解利用。因此,可以通過(guò)標(biāo)記長(zhǎng)壽命蛋白的降解產(chǎn)物來(lái)檢測(cè)自噬。將細(xì)胞與同位素標(biāo)記的氨基酸共培養(yǎng)(多為14C或3H標(biāo)記的纈氨酸或亮氨酸)數(shù)小時(shí)以標(biāo)記長(zhǎng)壽蛋白,再經(jīng)過(guò)一段潛伏期使蛋白酶體系統(tǒng)降解淘汰短壽命蛋白。
隨后經(jīng)自噬刺激物誘導(dǎo),細(xì)胞內(nèi)釋放出的降解蛋白產(chǎn)物通過(guò) 放射性同位素法定量測(cè)定,從而獲得一個(gè)的數(shù)值。此方法可以比較客觀地反映細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)壽蛋白的降解,而不是對(duì)自噬底物的簡(jiǎn)單標(biāo)記。同時(shí),為確保檢測(cè)結(jié)果反映的是自噬降解,可以進(jìn)一步在自噬抑制劑存在的情況下,原代細(xì)胞對(duì)比觀察自噬降解率的變化。
Isobavachalcone 20mg 補(bǔ)骨脂乙素 20784-50-3
Isochlorogenic acid A 20mg 異綠原酸A 2450-53-5
Isochlorogenic acid B 20mg 異綠原酸B 14534-61-3
Isochlorogenic acid C(4,5) 20mg 異綠原酸C(4,5) 57378-72-0
Isocorynoxeine 20mg 異去氫鉤藤堿 51014-29-0
Isofraxidin 20mg 異秦皮定 486-21-5
Isoginkgetin 20mg 異銀杏雙黃酮 548-19-6
Isoimperatorin 20mg 異歐前胡素 482-45-1
原代細(xì)胞
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