原代細胞轉染方案  一般原則：建立一套適當的轉染方案;首先從一種標準方案開始，然后通過改變試劑/DNA的配比和復合物的劑量進行優(yōu)化。 轉染復合物的制備——諸如轉染試劑/DNA配比，離子強度，緩沖液pH值，以及溫度等變量都會影響到轉染復合物的組成和功能。質?？捎脽o菌水或TE緩沖液稀釋。如果您要使用一種市售的轉染試劑，就應當仔細閱讀該試劑所提供的使用說明。在不含血清或其他蛋白的培養(yǎng)基中制備轉染復合物;如果制備復合物所使用的培養(yǎng)基含有血清，它就會對轉染產生抑制。制備轉染復合物的孵育時間是一個非常關鍵的環(huán)節(jié)，對于不同的轉染試劑而言可能差別很大。  轉染試劑/DNA配比(負載比)——所有的轉染試劑都會在某一個試劑/DNA配比時Z為有效。有時候這種配比的所在范圍非常狹窄;而且對于每種實驗體系都必須進行優(yōu)化才能得到配比。

形成轉染復合物所用的稀釋劑——對于多數試劑而言，很關鍵的一點是要使轉染復合物能在普通基礎培養(yǎng)基或鹽溶液中形成。 轉染復合物的加入——有兩種替換方法可用來將轉染復合物加入轉染細胞：1.將復合物濃縮液逐滴加入培養(yǎng)基，或者2.將轉染復合物先用培養(yǎng)基稀釋，然后進行培養(yǎng)基更換操作。*種方法更簡便，而第二種方法則更因為避免了試劑在局部濃聚而產生毒性，所以會使結果的一致性更好。 

時間進度  一般原則提示：要確保Z終結果的成功;建立一個合適的時間進度進行轉染實驗以保證您所需要的目的蛋白能得到表達。 原代細胞轉染的開始——在轉染前12小時，將細胞分種于培養(yǎng)板中。在細胞達到50-80%的融合率時開始轉染，這樣就可以使它們在實驗結束時達到接近的融合。細胞對轉染復合物的攝取通常在0.5-6小時的時間內完成。在這段時間后，就不會再發(fā)現轉染效率有所增長。養(yǎng)基更換——某些轉染試劑在攝取階段之后需要更換培養(yǎng)基。
10605-21-7         苯硫咪唑相關物質A標準品    30mg
        苯硫咪唑相關物質B標準品    30mg
    Quazepam Related Compound A    夸西泮相關物質A標準品    30mg
        美洛昔康相關物質D標準品    30mg
        頭孢丙烯相關雜質H標準品    30mg
        頭孢丙烯懸濁液標準品    30mg
        左沙丁胺醇鹽酸鹽相關物質A標準品    30mg
        左沙丁胺醇鹽酸鹽相關物質D標準品    30mg
99614-02-5     Ondansetron     昂丹司瓊標準品    300mg
959-24-0     Sotalol Hydrochloride     鹽酸索他洛爾標準品    300mg
92-13-7     Pilocarpine    毛果蕓香堿標準品    300mg
83915-83-7     Lisinopril     賴諾普利標準品    300mg
83-46-5     Beta-Sitosterol     β-谷固醇β-谷固醇標準品    300mg
原代細胞