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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

bFGF 大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T

 TAb 大鼠甲狀腺素抗體 規(guī)格： 48T/96T

 T4 大鼠甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T

 TG 大鼠甲狀腺球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TPO 大鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶 規(guī)格： 48T/96T

 PTHrP 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 PTH 大鼠甲狀旁腺激素 規(guī)格： 48T/96T

 AFP 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Methylase 大鼠甲基化酶 規(guī)格： 48T/96T

 SDF-1β/CXCL12 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β 規(guī)格： 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a 規(guī)格： 48T/96T

 TIMP-4 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 規(guī)格： 48T/96T

 TIMP-3 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 規(guī)格： 48T/96T

 TIMP-2 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2 規(guī)格： 48T/96T

 TIMP-1 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-9 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-8 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-7 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-5 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5 規(guī)格： 48T/96T

Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20 MMP-4 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-3 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-2 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-13 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-10 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-1 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1 規(guī)格： 48T/96T

 Myosin 大鼠肌球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MYO/MB 大鼠肌紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MYO/MB 大鼠肌紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Tn-Ⅰ 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

  ACV-RAb 大鼠活化素A受體抗體 規(guī)格： 48

2,2,2-三氟乙 354-38-1

對(duì)氨基酸甲酯 3544-25-0

5-溴煙腈 35590-37-5

N-芴甲氧羰基-L-* 35661-39-3

Fmoc-L-苯* 35661-40-6

Fmoc-L-* 35661-60-0

N-alpha-芐氧羰基-L-2,3-二氨基丙酸 35761-26-3

2-甲基噻唑 3581-87-1

三氟甲磺酸酐 358-23-6

芐基氯甲基醚 3587-60-8

CBZ-DL-苯* 3588-57-6

2-溴* 35905-85-2

2,2-二氟乙醇 359-13-7

樟腦磺酸 35963-20-3

丙脒鹽酸鹽 3599-89-1

N-羥基氨基甲酸叔丁酯 36016-38-3

鳥(niǎo)苷-5'-三磷酸三鈉鹽 36051-31-7

6-氨基*甲酯 36052-24-1

5-溴-2,4-二氯嘧啶 36082-50-5

4-氨基-5-咪唑甲酰胺 360-97-4

N-芐基哌啶酮 3612-20-2

氯甲酰乙酸乙酯 36239-09-5

2-氯-3-吡啶甲醛 36404-88-3

3-氰基-1,2,4-三氮唑 3641-10-9

4-溴-1-氟-2-硝基苯 364-73-8

4-氟-3-硝基苯胺 364-76-1

T/96T

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。