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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

2-氟苯硫酚 2557-78-0

去甲托品酮鹽酸鹽 25602-68-0

9-苯基-9-芴醇 25603-67-2

2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物 2564-83-2

2-溴乙胺氫鹽 2576-47-8

* 25812-30-0

順式-4-羥基-D-* 2584-71-6

氰基硼鈉 25895-60-7

哌啶-1-甲醛 2591-86-8

1-羥基苯并三唑 2592-95-2

Stbl2 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*101-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽 25952-53-8

甲氧甲?；鶃喖谆交?2605-67-6

5-溴-2-二甲基氨基吡啶 26163-07-5

6-溴-2-吡啶甲酸甲酯 26218-75-7

4-溴丁酸 2623-87-2

D-2-氨基丁酸 2623-91-8

D-2-氨基丁酸 2623-91-8？

N-Boc-L-哌啶-2-羧酸 26250-84-0

S-1-* 2627-86-3

4-吡啶丙醇 2629-72-3

氯鉻酸吡啶鹽 26299-14-9

L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽 26348-70-9

4-溴-1,2-亞甲二氧基苯 2635-13-4

疊氮磷酸二苯酯 2638

Gzms-B 人顆粒酶B 規(guī)格： 48T/96T

 Gzms-A 人顆粒酶A 規(guī)格： 48T/96T

 Cox V-IgM 人柯薩奇病毒IgM 規(guī)格： 48T/96T

 Cox V-IgG 人柯薩奇病毒IgG 規(guī)格： 48T/96T

 AHA 人抗組蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 H2A-H2B 人抗組蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 EMAb 人抗子宮內(nèi)膜抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ATA 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ACA/CENP 人抗著絲點(diǎn)抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ANGA 人抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w 規(guī)格： 48T/96T

 ANA 人抗中性粒細(xì)胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 pANCA 人抗中性粒細(xì)胞核周抗體 規(guī)格： 48T/96T

 cANCA 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ACA 人抗中性粒/中心體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 PCNA 人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體 規(guī)格： 48T/96T

 Apo A1 人抗載脂蛋白抗體A1 規(guī)格： 48T/96T

 TAP 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 SCL70/topoⅠ 人抗硬皮病抗體70 規(guī)格： 48T/96T

 HBcAb 人抗乙型肝炎病毒核心抗體 規(guī)格： 48T/96T

 HBcAb-IgM 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體 規(guī)格： 48T/96T

6-88-9

三氧化硫吡啶 26412-87-3

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。