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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 IgG *G 規(guī)格： 48T/96T

 Fcγ *G Fc片段 規(guī)格： 48T/96T

 FcγRⅢ/CD16 *G Fc段受體Ⅲ 規(guī)格： 48T/96T

 FcγRⅡ/CD32 *G Fc段受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 FcγRⅠ/CD64 *G Fc段受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 IgE *E 規(guī)格： 48T/96T

 FcεRⅡ/CD23 *E Fc段受體Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 FcεRⅠ *E Fc段受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 IgA *A 規(guī)格： 48T/96T

 FcαRⅠ/CD89 *A Fc段受體Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 Irna 人免疫核糖核酸 規(guī)格： 48T/96T

DB3.1 感受態(tài)細胞 100ul*10 irGH 人免疫反應性生長激素 規(guī)格： 48T/96T

 PWM 人美洲商陸素 規(guī)格： 48T/96T

 CED-3 人美麗線蟲凋亡基因 規(guī)格： 48T/96T

 ankyrin 人錨蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ATM 人毛細血管擴張性共濟失調突變基因 規(guī)格： 48T/96T

 Gliadin-IgA 人麥角蛋白IgA 規(guī)格： 48T/96T

 MV IgM 人麻疹病毒IgM 規(guī)格： 48T/96T

 MV IgG 人麻疹病毒IgG 規(guī)格： 48T/96T

 MV 人麻疹病毒 規(guī)格： 48T/96T

 PF 人落葉型天皰瘡抗體 規(guī)格： 48T/96T

 Helical Peptide 人螺旋肽 規(guī)格： 48T/96T

 RV Ag 人輪狀病毒抗原 規(guī)格

原甲酸*酯 149-73-5

DL-焦* 149-87-1

二苯基次膦酰氯 1499-21-4

氯化銥 14996-61-3

4-氯甲?；∷峒柞?1501-26-4

對氨基苯甲酸 150-13-0

3-甲氧基* 150-19-6

DL-苯* 150-30-1

二芐基二硫 150-60-7

4-甲氧基* 150-76-5

對苯二甲醚 150-78-7

莫西沙星 151096-09-2

1,3-二甲氧基苯 151-10-0

4-溴-1-茚酮 15115-60-3

十二烷基硫酸鈉 151-21-3

3-羥基-2-硝基吡啶 15128-82-2

2,6-二氟吡啶 1513-65-1

： 48T/96T

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。