購買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

MYO/MB 人肌紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MYO/MB 人肌紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Tn-Ⅰ 人肌鈣蛋白Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 FⅫa 人活化*Ⅻ 規(guī)格： 48T/96T

 APCR 人活化蛋白C抵抗素 規(guī)格： 48T/96T

 APC 人活化蛋白C 規(guī)格： 48T/96T

 LHRH 人黃體生成素釋放激素 規(guī)格： 48T/96T

 cAMP 人* 規(guī)格： 48T/96T

 cGMP 人環(huán)磷酸鳥苷 規(guī)格： 48T/96T

 COX-2 人環(huán)加氧酶2 規(guī)格： 48T/96T

 CsA 人*A 規(guī)格： 48T/96T

 talin 人踝蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ALOX-5 人花生四烯酸5脂加氧酶 規(guī)格： 48T/96T

 AA 人花生四烯酸 規(guī)格： 48T/96T

 EPOR 人紅細(xì)胞生成素受體 規(guī)格： 48T/96T

 EPO 人紅細(xì)胞生成素 規(guī)格： 48T/96T

 EMP 人紅細(xì)胞膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ESF 人紅細(xì)胞刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 sm Actinin-α  人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α  規(guī)格： 48T/96T

 MLZE 人黑素瘤衍生*拉鏈額外核因子 規(guī)格： 48T/96T

 MC Ab 人黑色素細(xì)胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 MSH 人黑色素細(xì)胞刺激素 規(guī)格： 48T/96T

 MMSAM 人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子 規(guī)格： 48T/96T

SURE 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20 MAGE 人黑色素瘤相關(guān)抗原 規(guī)格

2-氯茴香硫醚 17733-22-1

X2'-溴苯乙酮 2142-69-0

(1S,2S)-(+)-1,2-環(huán)己二胺 21436-03-3

4-氨基苯硼酸頻哪醇酯 214360-73-3

2,4-二羥基苯甲酸甲酯 2150-47-2

鄰甲氧基苯甲酰氯 21615-34-9

4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氫-3-氰基吡啶 21642-98-8

* 21645-51-2

(S)-3-Boc-氨基哌啶 216854-23-8

2-氨基-5-氟吡啶 21717-96-4

： 48T/96T

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。