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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 5克

shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 25克

shēng huà shì jì 鹽酸萘乙二胺 容量： 5克

shēng huà shì jì * 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽酸肼 容量： 25克

shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 25克

shēng huà shì jì 鹽酸環(huán)胞苷 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽酸胍 容量： 1克

shēng huà shì jì 鹽酸二苯肼 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽酸吡哆醛 容量： 2KU

shēng huà shì jì * 容量： 500U

shēng huà shì jì 鹽酸-S-芐基異硫脲 容量： 500克

shēng huà shì jì 鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽酸 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 鹽肉湯 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽培養(yǎng)基 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽還原試劑（甲、乙液） 容量： 1米

shēng huà shì jì 鹽胨水培養(yǎng)基 容量： 100克

shēng huà shì jì 鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 容量： 1米

shēng huà shì jì 巖藻多糖 容量： 2～8℃

 CD6 犬白細胞分化抗原6 規(guī)格： 48T/96T

 IL-6 犬白介素6 規(guī)格： 48T/96T

 IL-4 犬白介素4 規(guī)格： 48T/96T

 IL-2 犬白介素2 規(guī)格： 48T/96T

 IL-18 犬白介素18 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-γ 犬γ干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 GABA 犬γ氨基丁酸 規(guī)格： 48T/96T

 F-DH5α 感受態(tài)細胞 100ul*20β-EP 犬β內啡肽 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-α 犬α干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 5-HT 犬5羥色胺 規(guī)格： 48T/96T

 2,3-DPG 犬2,3-二磷酸甘油酸 規(guī)格： 48T/96T

 AE 禽腦脊髓炎 規(guī)格： 48T/96T

 MHC/BoLA 牛主要組織相容性復合體 規(guī)格： 48T/96T

 PROG 牛孕激素/孕酮 規(guī)格： 48T/96T

 ACAC 牛乙酰乙酸檢測 規(guī)格： 48T/96T

 IGF-1 牛胰島素樣生長因子1 規(guī)格： 48T/96T

 PAF 牛血小板活化因子 規(guī)格： 48T/96T

 SAA 牛血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 Zn-MT 牛鋅金屬硫蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CP 牛銅藍蛋白 規(guī)格： 48T/96T

5克

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。