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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

shēng huà shì jì 卵黃鈉瓊脂培養(yǎng)基 容量： 250克

shēng huà shì jì 卵黃高鹽瓊脂基礎(chǔ) 容量： 100克

shēng huà shì jì 卵黃*溶液 容量： 1米

shēng huà shì jì 卵白素（雞蛋） 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氯亞鉑酸鉀 容量： 1克

shēng huà shì jì 氯 容量： 5克

shēng huà shì jì 氯甲基樹(shù)脂 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氯化銀 容量： 25克

shēng huà shì jì 氯化銦 容量： 25克

shēng huà shì jì 氯化乙酰* 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化亞錫 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化亞銅 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 氯化亞鐵 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化亞汞 容量： 5克

shēng huà shì jì 氯化血紅素 容量： 1克

shēng huà shì jì 氯化鋅 容量： 25克

shēng huà shì jì 氯化硝基四氮唑藍(lán) 容量： 2～8°C 1克

shēng huà shì jì 氯化鍶 容量： 2～8℃ 100毫克

shēng huà shì jì 氯化鈰 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化十六烷基吡啶 容量： 2～8℃ 2毫克 

shēng huà shì jì 氯化銫 容量： 500u

 α-GST 人α*S轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 48T/96T

 α Manase 人α甘露糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-α 人α干擾素 規(guī)格： 48T/96T

 ACTN-3 人α-輔肌動(dòng)蛋白3 規(guī)格： 48T/96T

 BJ5183-AD-1 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*5Gal 人α半乳糖基抗體 規(guī)格： 48T/96T

 αGAL 人α半乳糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 αNAG 人αN已酰氨基葡糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 AFU 人αL巖藻糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 IDUA 人αL艾杜糖苷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 α2-PI 人α2纖溶酶抑制物 規(guī)格： 48T/96T

 α2-AP 人α2抗纖溶酶 規(guī)格： 48T/96T

 α2-MG 人α2巨球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 AMBP 人α1微球蛋白/bikunin前體 規(guī)格： 48T/96T

 α1-MG 人α1微球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 α1-AGP 人α1酸性糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 AACT 人α1抗胰* 規(guī)格： 48T/96T

 IFN-α/βR 人α/β干擾素受體 規(guī)格： 48T/96T

 XCR1 人XC趨化因子受體1 規(guī)格： 48T/96T

 TCR 人T細(xì)胞受體 規(guī)格： 48T/96T

 TCGF-Ⅲ 人T細(xì)胞生長(zhǎng)因子-Ⅲ 規(guī)格： 48T/96T

 LAT 人T細(xì)胞活化連接蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TU3A 人TU3A蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TLR-9/CD289 人Toll樣受體9 規(guī)格： 48T/96T

 THP 人TH糖蛋白 規(guī)格： 48T/96T

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。