當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>感受態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞>> S17-1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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更新時間:2019-09-20 16:32:38瀏覽次數(shù):154次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100-生命科學(xué)儀器
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20-生命科學(xué)儀器
JM109 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20-生命科學(xué)儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
Mach1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*20-生命科學(xué)儀器
購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | S17-1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
ADM 大鼠腎上腺髓質(zhì)素 規(guī)格: 48T/96T
ADRA1A 大鼠腎上腺素能a1A受體 規(guī)格: 48T/96T
ADRA1A 大鼠腎上腺素能a1A受體 規(guī)格: 48T/96T
EPI 大鼠腎上腺素 規(guī)格: 48T/96T
NT-4 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4 規(guī)格: 48T/96T
NT-3 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3 規(guī)格: 48T/96T
NSE 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶 規(guī)格: 48T/96T
NP-Y 大鼠神經(jīng)肽Y 規(guī)格: 48T/96T
NGF 大鼠神經(jīng)生長因子 規(guī)格: 48T/96T
GFAP 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ENA-78/CXCL5 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78 規(guī)格: 48T/96T
PEDF 大鼠色素上皮衍生因子 規(guī)格: 48T/96T
T3 大鼠三碘甲狀腺原氨酸 規(guī)格: 48T/96T
大鼠乳標(biāo)志物-CA153ELISA Kit,48T/96T 大鼠乳癌標(biāo)志物-CA153ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
LF/LTF 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格: 48T/96T
LDH 大鼠乳酸脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
CACT 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T
β-CG 大鼠絨毛膜*β 規(guī)格: 48T/96T
CG 大鼠絨毛膜*
shēng huà shì jì 髓過氧化物酶測試盒 容量: RT 10套/盒
shēng huà shì jì 隨機引物 容量: 2~8℃ 100毫克
shēng huà shì jì 酸性酯酶染液 容量: RT 250克
shēng huà shì jì 酸性氧化鋁 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 酸性肉湯 容量: 10克
S17-1 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10shēng huà shì jì 酸性茜素藍(lán)B 容量: 25克
shēng huà shì jì 酸性品紅 容量: 1克
shēng huà shì jì 酸性偶氮紅 容量: 25KU
shēng huà shì jì 酸性磷酸酶染液 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 酸性磷酸酶測試盒 容量: RT 500支/盒
shēng huà shì jì 酸性磷酸酶 容量: 25克
shēng huà shì jì 酸性蛋白酶 容量: 100克
shēng huà shì jì 酸性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ) 容量: 250克
shēng huà shì jì 酸洗石棉 容量: 25克
shēng huà shì jì 酸水解酪蛋白 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 蘇木素染液 容量: 10片/箱
shēng huà shì jì 蘇木色精 容量: 25克
shēng huà shì jì 蘇丹紅7B 容量: 250毫克
shēng huà shì jì 蘇丹黑 容量: 50毫克
shēng huà shì jì 蘇丹I 容量: 2500u
shēng huà shì jì 蘇丹Ⅳ 容量: 250毫克
shēng huà shì jì 蘇丹Ⅲ 容量: 500毫克
shēng huà shì jì 蘇丹Ⅱ 容量: 保存:-20℃ 500u
shēng huà shì jì 松三糖 容量: 25克
shēng huà shì jì *透醇 容量: 保存:-20℃ 50毫克
shēng huà shì jì 四正丁基氯化銨 容量: 25克
shēng huà shì jì 四正丁基碘化銨 容量: 100克
shēng huà shì jì 四乙酰核糖 容量: 500克
shēng huà shì jì 四乙酸鉛 容量: 500克
shēng huà shì jì 四乙基* 容量: 1克
shēng huà shì jì 四乙基氯化銨 容量: 5克
shēng huà shì jì 四乙基碘化銨 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 四氧嘧啶 容量: 5克
shēng huà shì jì 四氧化三鐵 容量: 25克
shēng huà shì jì 四氧化三錳 容量: 100克
shēng huà shì jì 四氧化三鈷 容量: 1公斤
規(guī)格: 48T/96T
PAPP-A 大鼠妊相關(guān)血漿蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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