購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 PCDH1 人原鈣黏素1 規(guī)格： 48T/96T

 Protamine 人* 規(guī)格： 48T/96T

 iNOS 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 FFA 人游離脂肪酸 規(guī)格： 48T/96T

 FEP 人游離原卟啉 規(guī)格： 48T/96T

 f-Hb 人游離血紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Free-T3 人游離三碘甲狀腺原氨酸 規(guī)格： 48T/96T

 fPSA 人游離前列腺特異性抗原 規(guī)格： 48T/96T

 FT4 人游離甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T

 F-TESTO 人游離睪酮 規(guī)格： 48T/96T

 FP-S 人游離蛋白S 規(guī)格： 48T/96T

 FE3 人游離雌三醇 規(guī)格： 48T/

shēng huà shì jì 皮粉（含鉻） 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì 鈹試劑II 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 鈹試劑Ⅰ 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 硼酸三正丁酯 容量： 25克

OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì 硼酸鉛 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 硼酸鎂 容量： 500克

shēng huà shì jì 硼酸銨 容量： 5克

shēng huà shì jì 硼酸 容量： 保存：-20℃ 25毫克

shēng huà shì jì 硼 容量： 5克

shēng huà shì jì 硼 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 培養(yǎng)皿刷 容量： 2～8℃ 1KU

shēng huà shì jì 滂胺天藍(lán) 容量： 1克

shēng huà shì jì 派洛寧Y 容量： 25克

shēng huà shì jì 派洛寧B 容量： 100克

shēng huà shì jì 哌-N，N-雙（2-乙磺酸鈉） 容量： 保存：-20℃ 250毫克

shēng huà shì jì 嗪-N,N-雙（2-乙磺酸） 容量： 1克

shēng huà shì jì 嗪-N，N-雙（2-羥基乙磺酸）鈉鹽 容量：

96T

注意事項:

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。