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Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器

參   考   價(jià): 1000

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:劉小姐查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2019-09-24 09:31:29瀏覽次數(shù):300次

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Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品名稱Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50
包裝100ul*50
分類表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

 OLAb 兔氧化低密度脂蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T

 Fbg 兔血纖蛋白原 規(guī)格: 48T/96T

 TXB2 兔血栓素B2 規(guī)格: 48T/96T

 CH50 兔血清總補(bǔ)體 規(guī)格: 48T/96T

 NO 兔血清一氧化氮 規(guī)格: 48T/96T

 GMP-140 兔血漿α顆粒膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T

 VWF 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格: 48T/96T

 ANG-2 兔血管生成素2 規(guī)格: 48T/96T

 VCAM-1/CD106 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T

 VEGF 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T

 ANG-Ⅱ 兔血管緊張素Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T

 cT 兔心肌特異性肌鈣蛋白T 規(guī)格: 48T/96T

 Rosetta-gami B(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50cTn-Ⅰ 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T

 TAFI 兔纖溶抑制因子 規(guī)格: 48T/96T

 PAP 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 規(guī)格: 48T/96T

 GHbA1c 兔糖化血紅蛋白A1c 規(guī)格: 48T/96T

 Renin 兔腎素 規(guī)格: 48T/96T

 PEDF 兔色素上皮衍生因子 規(guī)格: 48T/96T

 LF/LTF 兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格:

 

shēng huà shì jì * 容量: 1克

shēng huà shì jì 氫氧化鉀 容量: 500克

shēng huà shì jì 氫氧化鉻 容量: 25克

shēng huà shì jì 氫氧化鎘 容量: 100毫克

shēng huà shì jì 氫氧化鋯 容量: 100克

shēng huà shì jì 氫氧化鈣 容量: 500克

shēng huà shì jì 氫氧化鋇 容量: RT 5克

shēng huà shì jì 氫氧化銨 容量: 100克

shēng huà shì jì  容量: 100克

shēng huà shì jì 氫-鉀ATP酶測試盒 容量: RT 50支/包

shēng huà shì jì 酸 容量: 500克

shēng huà shì jì  容量: 保存:-20℃ 10片

shēng huà shì jì *鈉 容量: RT 5克

shēng huà shì jì *敏感紙片 容量: RT 100張/包

shēng huà shì jì ***溶液 容量: 25克

48T/96T

 LZM 兔* 規(guī)格: 48T/96T

注意事項(xiàng):

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。

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