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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
Origami2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | Rosetta 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
FⅡ 兔子*Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
TR 兔子*受體 規(guī)格: 48T/96T
BNP 兔子腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格: 48T/96T
ES 兔子內(nèi)皮抑素 規(guī)格: 48T/96T
eNOS-3 兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格: 48T/96T
ET-1 兔子內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T
ET-1 兔子內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T
IgM 兔子免疫球蛋白M 規(guī)格: 48T/96T
IgG 兔子免疫球蛋白G 規(guī)格: 48T/96T
IgE 兔子免疫球蛋白E 規(guī)格: 48T/96T
IgA 兔子免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
Sam 兔子可溶性粘附分子 規(guī)格: 48T/96T
Rosetta 2(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 sVCAM-1 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
sEPCR 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 規(guī)格: 48T/96T
sICAM-1 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
sCD40L 兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體 規(guī)格: 48T/96T
sP-selectin 兔子可溶性P選擇素 規(guī)格: 48T/96T
sE-selectin 兔子可溶性E選擇素 規(guī)格: 48T/96T
ANGA 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w 規(guī)格: 48T/96T
MIP-5 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T
Collagenase II 兔子膠原酶II 規(guī)格: 48T/96T
Collagenase I 兔子膠原酶I 規(guī)格: 48T/96T
bFGF 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T
T4 兔子甲狀腺素 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-1 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1
shēng huà shì jì 氧化鐠 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 氧化釹 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 氧化鎂 容量: 100克
shēng huà shì jì 氧化鋁H 容量: 100克
shēng huà shì jì 氧化鋁G 容量: RT 250克
shēng huà shì jì 氧化鋁60GF425 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 氧化鋁60G 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 氧化鋁 容量: 2~8℃ 10毫克
shēng huà shì jì 氧化鑭 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 氧化鈧 容量: RT,避光 10克
shēng huà shì jì 氧化金 容量: RT 500毫升
shēng huà shì jì 氧化鎵 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 氧化鉿 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 氧化鋯 容量: 10克
shēng huà shì jì 氧化鈣 容量: 500克
shēng huà shì jì 氧化釓 容量: 100克
shēng huà shì jì 氧化發(fā)酵試驗(yàn)(OF)培養(yǎng)基 容量: 25克
shēng huà shì jì 氧化鉺 容量: 10克
shēng huà shì jì 氧化銩 容量: 2~8℃ 25毫克
shēng huà shì jì 氧化鏑 容量: 25克
shēng huà shì jì 氧化鉍 容量: RT,避光 25克
shēng huà shì jì 羊毛脂 容量: 100克
shēng huà shì jì 羊膽鹽 容量: RT 5克
規(guī)格: 48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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