購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 TM 人血栓調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CH50 人血清總補(bǔ)體 規(guī)格： 48T/96T

 ST 人血清素/血清胺 規(guī)格： 48T/96T

 SAP 人血清淀粉樣蛋白P 規(guī)格： 48T/96T

 SAA 人血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 HSA 人血清白蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HA 人血凝素 規(guī)格： 48T/96T

 PS 人血漿抗凝蛋白S 規(guī)格： 48T/96T

 PC 人血漿抗凝蛋白C 規(guī)格： 48T/96T

 GMP-140 人血漿α顆粒膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HO-2 人血紅素氧合酶2 規(guī)格： 48T/96T

 HO-1 人血紅素氧合酶1 規(guī)格： 48T/96T

OverExpress C43(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 Hb-AGE 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物 規(guī)格： 48T/96T

 HB-β 人血紅蛋白β亞基 規(guī)格： 48T/96T

 HbH 人血紅蛋白H 規(guī)格： 48T/96T

 HbC 人血紅蛋白C 規(guī)格： 48T/96T

 angiostatin 人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 VWF 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格： 48T/96T

 BK 人血管舒緩激肽 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-R-Tie2 人血管生成素受體Tie2 規(guī)格： 48T/96T

 ANG-R-Tie1 人血管生成素受體Tie1 規(guī)

shēng huà shì jì 腦磷脂 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 腦浸粉（牛） 容量： 2～8℃，避光 5克

shēng huà shì jì 腦脊液蛋白測試盒 容量： RT 500克

shēng huà shì jì 萘酚綠B 容量： 100克

shēng huà shì jì 萘酚AS-TR乙酸酯 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì 萘酚AS-TR磷酸鹽 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 萘酚AS-BI磷酸二鈉 容量： 2～8℃ 5克

shēng huà shì jì 萘啶酮酸 容量： 100克

shēng huà shì jì * 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 鈉測試盒（帶標(biāo)準(zhǔn)） 容量： RT 10個

shēng huà shì jì 內(nèi)消旋-2,3-二溴丁二酸 容量： 500克

shēng huà shì jì 內(nèi)次甲基四氫苯二甲酸酐 容量： 2～8℃ 500ul

shēng huà shì jì 鉬酸鈉 容量： 500克

shēng huà shì jì 鉬酸銨 容量： RT 250克

shēng huà shì jì 鉬酸 容量： 5克

格： 48T/96

注意事項:

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。