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品 牌
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2019-09-24 10:40:22瀏覽次數(shù):1518次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 |
包裝 | 100ul*10 |
分類 | 根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
人卵清蛋白特異性IgE 規(guī)格: 48T/96T
人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit,48T/96T 人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
PEA 人綠膿桿菌外毒素A 規(guī)格: 48T/96T
TrxR 人硫氧還蛋白還原酶 規(guī)格: 48T/96T
Trx 人硫氧化還原蛋白 規(guī)格: 48T/96T
MS 人硫酸褪黑色素 規(guī)格: 48T/96T
KS 人硫酸角質(zhì)素 規(guī)格: 48T/96T
HSPG 人硫酸肝素糖蛋白 規(guī)格: 48T/96T
JE IgG 人流行性乙型腦炎抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T
EP 人流行性腮腺炎 規(guī)格: 48T/96T
FLU 人流感病毒抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T
FLU A 人流感病毒A 規(guī)格: 48T/96T
GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10 SCCAg 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T
SCCAg-2 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2 規(guī)格: 48T/96T
PIPLC 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 規(guī)格: 48T/96T
PLCγ1 人磷酯酶Cγ鏈 規(guī)格: 48T/96T
PLC 人磷酯酶C 規(guī)格: 48T/96T
PI Ab-IgG/IgM 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格: 48T/96T
GPC-3 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 規(guī)格: 48T/96T
PL-A2 人磷脂酶A2 規(guī)格: 48T/96T
PCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格: 48T/96T
PGM 人磷酸葡萄糖變位酶 規(guī)格: 48T/96T
PI3K 人磷酸肌醇3激酶 規(guī)格: 48T/96
shēng huà shì jì 硅粒 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 硅膠板HF254 容量: 保存-20℃ 25U
shēng huà shì jì 硅膠板H 容量: 2~8℃ 500毫克
shēng huà shì jì 硅膠板GF254 容量: 保存:-20℃ 10毫克
shēng huà shì jì 硅膠板GF 容量: 保存:-20℃ 10KU
shēng huà shì jì 硅膠板G 容量: 保存:-20℃ 150U
shēng huà shì jì 硅膠HF254 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 硅膠H 容量: 10KU
shēng huà shì jì 硅膠GF254 容量: 1克
shēng huà shì jì 硅膠G 容量: 保存:-20℃ 1克
shēng huà shì jì 硅膠60熒光薄層層析鋁箔板 容量: 25毫克
shēng huà shì jì 硅膠60熒光薄層層析玻璃板 容量: 保存-20℃ 5KU
shēng huà shì jì 硅膠60H 容量: 2~8℃ 25毫克
shēng huà shì jì 硅膠60G 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 硅膠60 薄層層析玻璃板 容量: 保存-20℃ 5KU
shēng huà shì jì 硅膠 容量: 5KU
shēng huà shì jì 硅(晶塊) 容量: 100克
shēng huà shì jì 光神霉素 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 寡霉素 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 寡聚脫氧胸苷纖維素 容量: 10克
shēng huà shì jì 固紫醬GBC鹽 容量: 250ku
shēng huà shì jì 固體改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 容量: 40克
T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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