購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格： 48T/96T

 ET-1 人內(nèi)皮素1 規(guī)格： 48T/96T

 EG-VEGF 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 ET 人內(nèi)毒素 規(guī)格： 48T/96T

 TdT 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格： 48T/96T

 TCC C5b-9 人末端補體復(fù)合物C5b-9 規(guī)格： 48T/96T

 ponticulin 人膜橋蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ANX-Ⅴ 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ 規(guī)格： 48T/96T

 MAC 人膜攻擊復(fù)合物 規(guī)格： 48T/96T

 MCP/CD46 人膜輔蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MIS/AMH 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 規(guī)格： 48T/96T

 IAP 人免疫抑制酸性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 IgHV *重鏈可變區(qū) 規(guī)格： 48T/96T

GV3101 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*10 IgH *重鏈 規(guī)格： 48T/96T

 ILTsR/LIR/CD85 *樣轉(zhuǎn)錄體受體 規(guī)格： 48T/96T

 λ-IgLC *輕鏈lambda 規(guī)格： 48T/96T

 κ-IgLC *輕鏈kappa抗體 規(guī)格： 48T/96T

 IgM *M 規(guī)格： 48T/96T

 Ig-j *j鏈 規(guī)格： 48T/96T

 IgG *G 規(guī)格： 48T/96T

 Fcγ *G Fc片段

shēng huà sh

shēng huà shì jì 硅藻土G 容量： 25克

shēng huà shì jì 硅藻土 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 硅油 容量： 25克

shēng huà shì jì 硅鎢酸 容量： 2～8℃，避光 10克

shēng huà shì jì *KH570 容量： 10克

shēng huà shì jì *KH560 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì *KH550 容量： 10克

shēng huà shì jì 硅酸鋅 容量： RT，避光 25克

shēng huà shì jì 硅酸鈉 容量： 1克

shēng huà shì jì 硅酸鋁 容量： 500克

shēng huà shì jì 硅酸鉀 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 硅酸鈣 容量： 5克

規(guī)格： 48T/96T

注意事項:

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。