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更新時間:2019-09-24 10:24:47瀏覽次數(shù):156次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*50-生
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞 100ul*10-生
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學儀器
OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學儀器
Origami2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學儀器
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產(chǎn)品名稱 | JM109(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 表達感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
EPI 人腎上腺素 規(guī)格: 48T/96T
ACA 人腎上腺皮質(zhì)抗體 規(guī)格: 48T/96T
nephrin 人病蛋白 規(guī)格: 48T/96T
NAIP 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白 規(guī)格: 48T/96T
NT-4 人神經(jīng)營養(yǎng)因子4 規(guī)格: 48T/96T
NT-3 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3 規(guī)格: 48T/96T
NCAM-L1/CD171 人神經(jīng)細胞粘附分子配體1 規(guī)格: 48T/96T
NSE 人神經(jīng)特異性烯醇化酶 規(guī)格: 48T/96T
NP-Y 人神經(jīng)肽Y 規(guī)格: 48T/96T
p2 人神經(jīng)髓鞘蛋白 規(guī)格: 48T/96T
JM109(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 NF 人神經(jīng)絲蛋白 規(guī)格: 48T/96T
NF 人神經(jīng)絲蛋白 規(guī)格: 48T/96T
人神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit2 ELISA Kit,48T/96T 人神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit2 ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
fractalkine/CX3CL1 人神經(jīng)趨化蛋白 規(guī)格: 48T/96T
GFAP 人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 規(guī)格: 48T/96T
NT 人神經(jīng)降壓素 規(guī)格: 48T/96T
NKB 人神經(jīng)激肽B 規(guī)格: 48T/96T
CVNPF 人神經(jīng)保護因子 規(guī)格: 48T/96T
NA 人神經(jīng)氨酸酶 規(guī)格: 48T/96T
ENA-78/CXCL5 人上皮中性粒細胞活化肽78 規(guī)格: 48T/96T
Ep-CAM/CD362 人上皮細胞粘附分子 規(guī)格: 48T/96T
ESA 人上皮特異性抗原 規(guī)格: 48T/96T
EMA 人上皮膜抗原 規(guī)格: 48T/
u10克 100ku
shēng huà shì jì 鄰菲啰啉 容量: 保存:-20℃ 150ku
shēng huà shì jì 鄰二甲苯 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸氫鉀 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸酐 容量: 2~8℃ 10毫克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸二正辛酯 容量: 500克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸二正戊酯 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸二壬酯 容量: 100克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸二甲酯 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸二環(huán)己酯 容量: 1克
shēng huà shì jì 鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 容量: 10毫升
shēng huà shì jì 鄰苯二甲醛 容量: 500克
shēng huà shì jì 鄰苯二酚紫 容量: 保存:-20℃ 50毫克
shēng huà shì jì 鄰苯二酚 容量: 保存:-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 鄰苯二胺鹽酸 容量: 2~8℃ 100毫克
shēng huà shì jì 鄰苯二胺 容量: 5毫克
shēng huà shì jì 亮* 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 亮綠乳糖培養(yǎng)基 容量: 1米
shēng huà shì jì 亮綠SF(淡黃) 容量: 2~8°C 25克
shēng huà shì jì 亮綠 容量: 25克
96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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