當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>感受態(tài)細(xì)胞>>根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞>> GV3101(pSoup-19)電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時間:2019-09-24 11:01:20瀏覽次數(shù):327次
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產(chǎn)品名稱 | GV3101(pSoup-19)電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50 |
包裝 | 50ul*50 |
分類 | 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
HLA-A 人類白細(xì)胞抗原A 規(guī)格: 48T/96T
mTOR 人雷帕霉素靶蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TH 人*羥化酶 規(guī)格: 48T/96T
Tyk-2 人*激酶2 規(guī)格: 48T/96T
GM1 人抗*抗體 規(guī)格: 48T/96T
BPI-Ab 人抗殺菌通透性增高蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-parotid duct Ab 人抗腮腺管抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-parotid duct Ab 人抗腮腺管抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-cartilage-Ab 人抗軟骨抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-cartilage-Ab 人抗軟骨抗體 規(guī)格: 48T/96T
AhCGAb 人抗人絨毛膜*抗體 規(guī)格: 48T/96T
AhCGAb 人抗人絨毛膜*抗體 規(guī)格: 48T/96T
HIV 人抗人類免疫缺陷病毒抗體 規(guī)格: 48T/96T
HIV 人抗人類免疫缺陷病毒抗體 規(guī)格: 48T/96T
GV3101(pSoup-19)電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50 anti-chromosome Ab 人抗染色體抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-chromosome Ab 人抗染色體抗體 規(guī)格: 48T/96T
PCA-1/Yo 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體 規(guī)格: 48T/96T
ASMA 人抗平滑肌抗體 規(guī)格: 48T/
shēng huà shì jì 疊氮鈉葡萄糖肉湯 容量: 150米
shēng huà shì jì 鈉 容量: 500毫克
shēng huà shì jì 靛藍(lán)胭脂紅 容量: 5克
shēng huà shì jì 靛基質(zhì)試驗培養(yǎng)基 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 靛基質(zhì)(Kovacs) 容量: RT 1米
shēng huà shì jì *測試盒 容量: 1個
shēng huà shì jì 電解錳 容量: 100克
shēng huà shì jì 碘硝基氯化四氮唑藍(lán) 容量: 25克
shēng huà shì jì 碘酸鈉 容量: RT 500克
shēng huà shì jì * 容量: 保存:-20℃ 250毫克
shēng huà shì jì 碘溶液(碘和*混合溶液) 容量: 1米
shēng huà shì jì 碘化銀 容量: RT 1克
shēng huà shì jì 碘化銅 容量: RT 100克
shēng huà shì jì 碘化銫 容量: 5克
shēng huà shì jì 碘化鉛 容量: 500克
shēng huà shì jì 碘化鎘 容量: 1克
shēng huà shì jì 碘化丙啶 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 碘化鉍鉀 容量: 500克
shēng huà shì jì 碘化銨 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 碘化[1-環(huán)己基-3-(3-*氨丙基)碳二亞胺] 容量: 100克
shēng huà shì jì 碘伏(液體) 容量: 10只/袋
96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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