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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2019-09-24 11:36:50瀏覽次數(shù):197次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | AGL1(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
βAPP 人淀粉樣前體蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Amylase 人* 規(guī)格: 48T/96T
ETFB 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽 規(guī)格: 48T/96T
FⅧAg 人第八因子相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T
Resistin 人抵抗素 規(guī)格: 48T/96T
HIF-1α 人低氧誘導(dǎo)因子1α 規(guī)格: 48T/96T
LRP-6 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6 規(guī)格: 48T/96T
LDLR 人低密度脂蛋白受體 規(guī)格: 48T/96T
LDL-IC 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 規(guī)格: 48T/96T
LDL 人低密度脂蛋白 規(guī)格: 48T/96T
LMP7/PSMB9 人低分子質(zhì)量蛋白7 規(guī)格: 48T/96T
LMWH 人低分子肝素 規(guī)格: 48T/96T
NGF 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit,48T/96T 人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
ConA 人刀豆素A 規(guī)格: 48T/96T
PLP 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體 規(guī)格: 48T/96T
PR3-ANCA 人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 規(guī)格: 48T/96T
PPP1R1A 人蛋白磷酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A 規(guī)格: 48T/96T
PP 人蛋白磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
PTP/PTPase/CD148 人蛋白*磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
PTP/PTPase/CD148 人蛋白*磷酸
shēng huà shì jì 變色硅膠 容量: 5KU
AGL1(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì 芐脒 容量: 保存:-20℃ 250毫克
shēng huà shì jì 芐基三乙
shēng huà shì jì α-甘油磷酸脫氫酶-磷酸丙糖異構(gòu)酶 容量: RT 5克
shēng huà shì jì α-甘油磷酸脫氫酶 容量: 1公斤
shēng huà shì jì α-甘油磷酸鎂鹽 容量: 1克
shēng huà shì jì α-甘油磷酸二鈉 容量: 500毫克
shēng huà shì jì α-*(枯草桿菌) 容量: 5克
shēng huà shì jì α-半乳糖苷酶 容量: 25克
shēng huà shì jì YNB培養(yǎng)基 容量: RT 100轉(zhuǎn)/箱
shēng huà shì jì YM瓊脂 容量: 25毫升
shēng huà shì jì YM11瓊脂 容量: 2~8℃ 25毫升
shēng huà shì jì YGC瓊脂 容量: 2~8℃ 25毫升
shēng huà shì jì X-SA瓊脂培養(yǎng)基 容量: RT 1把/包
shēng huà shì jì XM-G瓊脂培養(yǎng)基 容量: RT 1個(gè)
shēng huà shì jì XLT4瓊脂 容量: 500克
shēng huà shì jì XLD培養(yǎng)基 容量: 100克
shēng huà shì jì X-GAL瓊脂培養(yǎng)基 容量: RT 1個(gè)
shēng huà shì jì WS瓊脂 容量: 100毫升
shēng huà shì jì WORT肉湯 容量: 2~8℃ 5毫升
shēng huà shì jì WORT瓊脂 容量: 2~8℃ 5克
shēng huà shì jì WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂 容量: 2~8℃ 100毫升
shēng huà shì jì WILKINS-CHALGREN瓊脂 容量: 100克
shēng huà shì jì VRBG瓊脂 容量: 2~8℃ 25毫升
酶 規(guī)格: 48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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