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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

 fMet 人甲酰* 規(guī)格： 48T/96T

 PGD2-MOX 人甲肟前列腺素D2 規(guī)格： 48T/96T

 Methylase 人甲基化酶 規(guī)格： 48T/96T

 MTX 人胺喋呤 規(guī)格： 48T/96T

 PV-IgG 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG 規(guī)格： 48T/96T

 CSF 人集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 VLDLR 人極低密度脂蛋白受體 規(guī)格： 48T/96T

 KLK 8 人*8 規(guī)格： 48T/96T

 KLK 6 人*6 規(guī)格： 48T/96T

 KLK 11 人*11 規(guī)格： 48T/96T

 KLK 10 人*10 規(guī)格： 48T/96T

 KLK 1 人*1 規(guī)格： 48T/96T

 CKMB 人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB 規(guī)格： 48T/96T

 SDF-1β/CXCL12 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β 規(guī)格： 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a 規(guī)格： 48T/96T

 ST3 人基質(zhì)裂解素 規(guī)格： 48T/96T

 ST2 人基質(zhì)裂解素 規(guī)格： 48T/96T

 ST1 人基質(zhì)裂解素 規(guī)格： 48T/96T

 MAT 人基質(zhì)裂解蛋白 規(guī)格： 48T/96T

EHA105 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50 TIMP-1 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1 規(guī)

shēng huà shì jì 丙酸正丙酯 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì 丙酸鈉 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì 丙二酰胺 容量： 100克

shēng huà shì jì 丙二酸鈉一水物 容量： 1克

shēng huà shì jì 丙二酸鈉培養(yǎng)基 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 丙二酸鈉 容量： 5克

shēng huà shì jì 丙二酸二乙酯 容量： 25克

shēng huà shì jì 丙二酸二甲酯 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 丙二酸 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 丙二醛測(cè)試盒 容量： RT 20個(gè)/包

shēng huà shì jì 丙二腈 容量： 50毫升

shēng huà shì jì 丙二醇甲醚 容量： 100克

shēng huà shì jì *氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒 容量： 40片/箱

shēng huà shì jì 標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 標(biāo)準(zhǔn)方法瓊脂 容量： RT 100張/盒

shēng huà shì jì 標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 容量： 500毫升

shēng huà shì jì 標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 容量： 2～8℃ 100毫升

shēng huà shì jì 變色酸二鈉鹽 容量： 2～8℃ 5克

shēng huà shì jì 變色酸 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 變色素2R 容量： 100克

格： 48T/96T

 TIMP-4 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 規(guī)格： 48T/96T

注意事項(xiàng):

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。