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更新時間:2019-09-24 11:52:42瀏覽次數(shù):1743次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網GV3101(pSoup) 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細胞 50ul*50-生命科學儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*100-生命科學儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學儀器
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產品名稱 | LBA4404 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 根癌農桿菌感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
E2 人雌二醇 規(guī)格: 48T/96T
PACAP 人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 規(guī)格: 48T/96T
VMA 人垂草扁桃酸 規(guī)格: 48T/96T
PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白 規(guī)格: 48T/96T
PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白 規(guī)格: 48T/96T
VLA 人遲現(xiàn)抗原 規(guī)格: 48T/96T
VLA 人遲現(xiàn)抗原 規(guī)格: 48T/96T
MPF 人成熟促進因子 規(guī)格: 48T/96T
OLBA4404 感受態(tài)細胞 100ul*50GP 人成骨生長肽 規(guī)格: 48T/96T
SOD 人超氧化物歧化酶 規(guī)格: 48T/96T
hs-CRP 人超敏C反應蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Sag 人超抗原 規(guī)格: 48T/96T
iFABP 人腸脂肪酸結合蛋白 規(guī)格: 48T/96T
Enterovirus 人腸病毒 規(guī)格: 48T/96T
LATS 人*甲狀腺刺激素 規(guī)格: 48T/96T
OPAs 人不透光相關蛋白 規(guī)格: 48T/96T
LTB 人不耐熱腸毒素B亞單位 規(guī)
shēng huà shì jì T1N1瓊脂 容量: 2~8℃ 150毫升
shēng huà shì jì S-乙酰巰基丁二酸酐 容量: 100毫克
shēng huà shì jì S-腺苷高半*水解酶 容量: 100克
shēng huà shì jì S-羧甲基-L-半* 容量: RT 25克
shēng huà shì jì SYBR Green 1 熒光染料 容量: 1克
shēng huà shì jì Super Script Ⅱ陰性逆轉錄酶 容量: RT 25克
shēng huà shì jì SS瓊脂平板 容量: 1米
shēng huà shì jì SP瓊脂糖凝膠FF 容量: 2~8℃ 100毫克
shēng huà shì jì SP葡聚糖凝膠C-50 容量: 50KU
shēng huà shì jì SP葡聚糖凝膠C-25 容量: 保存:-20℃ 10KU
shēng huà shì jì SPS試劑 容量: 1米
shēng huà shì jì SP6 RNA聚合酶 容量: 5克
shēng huà shì jì SIM動力培養(yǎng)基 容量: RT 10克
shēng huà shì jì SDS-PAGE蛋白質中分子量 容量: 100克
shēng huà shì jì SDS-PAGE蛋白質高分子量 容量: 1公斤
shēng huà shì jì SDS-PAGE蛋白質低分子量標準 容量: 2~8℃ 5克
格: 48T/96T
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉化的感受態(tài)細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
LBA4404 感受態(tài)細胞 100ul*50 |
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