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更新時間:2017-06-07 15:28:07瀏覽次數(shù):124次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、人膀胱移行細胞瘤細胞;RT4技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 人膀胱移行細胞瘤細胞;RT4
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞來源于一名63歲白人男性的移行細胞狀瘤,可作為轉(zhuǎn)染宿主。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:4傳代,每周2~3次。
傳代情況 P(175+5)
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類人膀胱移行細胞瘤細胞;RT4處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Acetyl-Histone H4(K5) 乙?;M蛋白H4抗體GSK-3 Beta() (Glycogen Syhase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β(抗原)
Acetyl-Histone H4(K16) 乙?;M蛋白H4(K16)抗體CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 ) G蛋白偶聯(lián)受體-2(抗原)
AFP 甲胎蛋白抗體GSK-3 Beta, (Glycogen Syhase Kinase-3) 葡萄糖合成激酶-3(抗原)
AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環(huán)水解酶(抗原)
ADAM17/CD156b 腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原)
PGT/Slco2a1 溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區(qū)(多肽)
ADAM10/MADM/CD156c 去整合素樣金屬蛋白酶10抗體HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1(抗原)
Salmonella 沙門氏菌抗體(多型)HCV-NS3 丙型肝炎病毒-NS3(抗原)
ADAM11 去整合素樣金屬蛋白酶11抗體HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a(抗原)
Histone H3 (Tri Methyl K4) *基化組蛋白H3抗體HEV 戊型肝炎病毒(抗原)
MAGEA11 黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病毒(抗原)
ADAMTS12 整合素樣金屬蛋白酶與*1型-12抗體HisX6 聚*標(biāo)簽蛋白
ADH/AVP 抗利尿激素/血管升壓素抗體(和肽素)HIV gp120 艾滋病病毒(抗原)
GDF9 生長分化因子9抗體HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60(抗原)
ADAM8 去整合素樣金屬蛋白酶8抗體HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原)
-3 神經(jīng)營養(yǎng)因子3抗體alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原
ADAM9 去整合素樣金屬蛋白酶9抗體ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)
ABHD5 自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體IDE 胰島素降解酶(抗原)
MRC1/CD206 巨噬細胞甘露糖受體抗體IGF-1 R 人胰島素樣生長因子-I受體
Bone Sialoprotein/BSP 骨涎蛋白IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5(抗原)
NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化酶4抗體Isulin 胰島素(抗原)
ABP1 植物生長激素ABP1抗體APC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
Podoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮細胞蛋白)Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗原
Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原
CD168/RHAMM 透明質(zhì)酸介導(dǎo)細胞游走受體抗體APG4B/AUTL1 APG4B細胞自噬相關(guān)抗原
polyprotein[Classical swine fever virus, CSFV] 抗豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病病毒抗體apoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human 載脂蛋白A1抗原
CSFV/Classical swine fever virus 豬瘟病毒抗體Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原
CSFV/Classical swine fever virus 豬瘟病毒抗體Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
Iegrin beta 6 整合素β6抗體(Iegrin β6)Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原)
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