公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè)，主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù)，公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H446
技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù)，其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù)，以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H446
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁/懸浮生長(zhǎng)，混合
特征特性  該細(xì)胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。這個(gè)細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；*脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測(cè)水平。與正常細(xì)胞相比，該細(xì)胞c-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍，RNA增加15倍。Z初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10 nM、0.005 mg/ml胰島素、0.01 mg/ml轉(zhuǎn)鐵
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(87+5)
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H446
處理方法
1、用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的）培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基，若出現(xiàn)渾濁情況，請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察，如有污染，請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作，拆下封口膜，如果細(xì)胞的量較少，可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠，可進(jìn)行離心收集細(xì)胞，用1×PBS洗兩遍，加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃，5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象，建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài)，可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。解凍后，用75%酒精將凍存管擦拭干凈，用吸管吸出細(xì)胞懸液，放入培養(yǎng)瓶中，再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液，放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí)：
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少， 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性 損傷， 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳， 常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？
冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
GIDRP88  生長(zhǎng)抑制和分化相關(guān)蛋白抗體H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin)  流感病毒A抗原
Gas1  生長(zhǎng)休止特定蛋白1抗體H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin)  流感病毒A抗原
MDFIC  肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體Haase(hyaluronidase)  透明質(zhì)酸酶/*抗原
MEI-1  減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體HA tag  HA tag標(biāo)簽多肽
MTBP/MDM2BP  雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體HA tag(map)  HA tag標(biāo)簽（分支多肽）
NIRF/RNF107  環(huán)指蛋白107抗體HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1)  肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制因子抗原
Necdin  生長(zhǎng)抑制蛋白NDN抗體HBA1(hemoglobin alpha 1)  人類血紅蛋白α1抗原
RPRD1A/P15RS  細(xì)胞周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白抗體VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-coaining)  乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
PCNP  PEST含核蛋白抗體URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)  乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
PLK4/STK18  */*蛋白激酶18URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal  肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原
Quiescin Q6/QSOX1  巰基氧化酶1抗體Beta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta)  人beta 亞基人絨毛膜*抗原
LEU5/RFP2  白血病相關(guān)蛋白5抗體Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha )  人α亞基人絨毛膜*多肽抗原
SAPK3/MAPK12  應(yīng)激活化蛋白激酶3抗體（絲裂原活化蛋白激酶12）HCFHrp/BTA(Bladdertumor aigen)human  膀胱腫瘤抗原
SCGB3A1  結(jié)合珠蛋白家族3A1抗體CD36L1/SRB1 peptide  高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原
SEI2/SERTAD2  調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體HER2 receptor()(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus)  c-erbB-2受體抗體(N端)
SIPA1  信號(hào)誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體HER2 receptor()(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus)  c-erbB-2受體抗原(N端)
AGER  晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體HGF(hepatocyte growth factor)  肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗原
Fast skeletal Myosin/MRLC2  骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P)  人類皰疹病毒8抗原
TFDP3  轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體（肝癌相關(guān)抗原661）HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P)  人類皰疹病毒8抗原
BMP1  骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切酶抗體HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P)  人類皰疹病毒8抗原
SMARCA2/BRM  ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體HIF-1 Beta/AR1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta)  缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗原
Ferritin Light Chain  鐵蛋白輕鏈抗體HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha)  缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗原
CECR5  貓眼綜合征染色體候選基因5抗體Histone H1b(Histone H1.4)  組蛋白H1b抗原
CEE  跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體HDAC1/HD1(histone deacetylase 1)  組織蛋白去乙?；?抗原
CESK1  分子伴侶CESK1蛋白抗體Flag-Tag (CT)  Flag Tag標(biāo)簽多肽
CHCHD2  丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag  標(biāo)簽DYKDDDDK Tag分支肽
CHKL/Ethanolamine kinase beta  乙醇胺激酶β抗體T7 tag(recombina T7-tagged proteins)  T7 tag標(biāo)簽抗原
CHORDC1  含半*和*豐富域蛋白1抗體V5 tag(recombina V5-tagged protein)  V5 tag多肽抗原
HIV2 gp36  人類免疫缺陷病毒2型抗體（艾滋病病毒）KT3 tag  KT3 tag標(biāo)簽抗原
phospho-CDK5(Tyr15)  磷酸化周期素依賴性激酶5抗體VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein)  VSV-G tag標(biāo)簽抗原
MRC2/CD280  巨噬細(xì)胞甘露糖受體2抗體HLA-DR(human leukoyte Aigen DR)  HLA-DR抗原
Tetranectin/CLEC3B/TNA  四連接素TN抗體HLA-E  人類白細(xì)胞抗原E
CLLD8/SETDB2  組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體Ai-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1)  高遷移率族蛋白A1抗原
FbxO6  F-box蛋白相關(guān)蛋白6抗體HMGA2 (high mobility group A2)  高遷移率族蛋白A2抗原
C3c/Compleme fragme 3c  補(bǔ)體片段C3c抗體HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1)  血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原
phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗體HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1)  血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原
phospho-PP2A alpha(Tyr307)  磷酸化蛋白磷酸酶2A（PP2Aα）抗體HO-2(Heme oxygenase 2)  血紅素氧合酶-2抗原
phospho-PP2A alpha/beta(Tyr119)  磷酸化蛋白磷酸酶2A（PP2Aα）抗體phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly)  異染色質(zhì)蛋白1(磷酸化多肽)
phospho-eIF4EBP1(Thr36)  磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide  異染色質(zhì)蛋白1（磷酸化多肽）
phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36)  磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16)  人類狀瘤病毒16抗原
PI3 Kinase p110 beta  磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗體HPV18 E6  人類狀瘤病毒18E6
SNX27  SNX27蛋白抗體HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16)  人類狀瘤病毒16抗原
TRPV4/TRP12  瞬時(shí)受體電位蛋白12抗體Hpt/HP(haptoglobin)  結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原
TH/T-H glycoprotein  TH糖蛋白抗體H-ras/Ras/Ras p21 peptide  原癌基因H-ras抗原
UHRF1  核蛋白95抗體HSTF2/HSF2 peptide  熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗原
PPP4C  */*蛋白磷酸酶4C抗體BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白（抗原）
GNLY/NKG5  顆粒溶素抗體Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3)  HRAS樣抑制因子3抗原
Tuftsin  促吞噬肽抗體HSP47(Heat shock protein-47)  熱休克蛋白-47抗原