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人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞;KU812

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公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞;KU812
技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞;KU812
形態(tài)特性  骨髓母細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性  從一位慢性髓性白血病患者暴發(fā)期的外周血建立了KU812細(xì)胞株。 這些細(xì)胞至少有一個(gè)Ph1(費(fèi)城)染色體。 這株細(xì)胞有一些嗜堿性細(xì)胞的標(biāo)記(如Fc 受體,堿性顆粒,生成組胺),而淋巴標(biāo)記陰性。
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法  1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞;KU812
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
BCAT1  胞漿支鏈氨基酸酸轉(zhuǎn)氨酶抗體NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2)  神經(jīng)肽Y受體2(多肽)
BMP5  骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體NPY1R (neuropeptide Y1 receptor)  神經(jīng)肽Y1受體抗原
Hepatic lipase  肝脂酶抗體NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l)  醌氧化還原酶抗原
GABA Transporter 1/GAT-1  γ氨基丁酸運(yùn)載蛋白1抗體NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1(多肽)
PAPPA  相關(guān)血漿蛋白A抗體NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1抗原
PPT1  棕櫚酰蛋白硫酯酶1抗體NR1/NMDAR1  *受體1
CRHR2  促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C)  *受體2C(多肽)
CHX10  CHX10蛋白抗體N-ras  原癌基因抗原
Glycophorin C/CD236  糖蛋白C抗體Nrf2 peptide  核因子2相關(guān)因子2抗原
Frizzled 2  W信號(hào)受體FZD2蛋白抗體NRF-1(nuclear respiratory factor-1)  核呼吸因子-1抗原
IHH  HHG2抗體NSE (neuron specific enolase)  神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原
Insig2  胰島素誘導(dǎo)基因2抗體CP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide)  鈉離子/牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原
MCHR/GPR24  G蛋白偶聯(lián)受體24抗體Ghrelin 28  腦腸肽28
PSMC1/Proteasome 19S S4   26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體OCLN(Occluding)  咬合蛋白抗原
ZDHHC17/HIP14  NFκB激活蛋白205抗體Oct-4(Octamer-4)  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗原
FANK1  HSD13蛋白抗體ODC(Ornithine decarboxylase)  *脫羧酶抗原
Destrin 19/ADF  肌動(dòng)蛋白解聚因子19抗體ompF(putative outer membrane porin F protein)  小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原
Neurotensin/S  神經(jīng)緊張素抗體OLFM1 peptide  嗅球蛋白1多肽抗原
NESG1/CCDC19  鼻咽上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體ORX-A(orexin-A)  增食欲素-A/欲激素A抗原
FOXL2  小瞼裂綜合征蛋白BPES抗體OTR(oxytocin receptor)  *受體
XPC  DNA補(bǔ)充修復(fù)XPC細(xì)胞蛋白抗體OXR (Orexin receptor)  食欲素受體(多肽)
EPHA10  *蛋白激酶受體A10抗體P2P-R/RBBP6(proliferation poteial protein related)  增殖潛能相關(guān)蛋白抗原
TP53I8/EI24  腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8P19ARF  p19ARF抑癌基因抗原
EVC2  膜蛋白EVC2抗體phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原
BMPR1B  骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體MKK3(MAP Kinase Kinase 3)  絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原
Vinculin  粘著斑蛋白抗體P53(wt-p53)  腫瘤抑制基因抗原(野生型P53)
DNA Ligase 1  DNA連接酶1抗體Mtp53(Muta type p53)  突變型P53抗原
FOXC1/FREAC3  叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體WIG-1(wtp53-induced gene 1)  野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原
SCYL1BP1  SCYL結(jié)合蛋白1抗體P73 protein  P73腫瘤抑制基因抗原
Gephyrin  橋尾蛋白抗體p70 S6 Kinase/P70 Beta1  p70S6Kb抗原
W7A  原癌基因w7a蛋白抗體PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關(guān)蛋白2
BLK/MODY11  B淋巴細(xì)胞*激酶抗體PAFR/PTAFR  血小板活化因子受體抗原
COG1  COG1蛋白抗體Phospho-PAK4 (Ser99) peptide  磷酸化p21激活激酶4多肽抗原
BAP31  BAP31蛋白抗體PAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7/PAK5抗原
ADORA1/Adenosine A1 Receptor  腺苷A1受體抗體PAR-1 (Protease-activated receptors-1)  蛋白酶激活受體-1抗原
 

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