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更新時(shí)間:2017-06-04 22:07:49瀏覽次數(shù):230次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 RAW264.7
公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 3T3-L1是從3T3細(xì)胞(Swiss albino)中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性;可產(chǎn)生甘油三酯,高濃度血清可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體 68-72
使用權(quán)限 A類
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色粉末,豬胰提取
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)催化*酯水解產(chǎn)生*和脂肪酸
〖保存〗:-20℃
葡萄糖氧化酶
〖英文名稱〗:Glucose oxidase;GOX;GOD
〖號〗:9001-37-0
〖級別〗:BR
活力:100~250u/mg
活力定義:37℃,PH5.7條件下,每分鐘形成1umol過氧化輕所需要的酶量
溶解度Solubility (1%, Water):Pass
PH穩(wěn)定性:4.5~6.5
PH:5.5
熱穩(wěn)定性:<50℃(PH7.0,15min)
適作用溫度30℃~60℃
使用方法:測活時(shí),用10mM檸檬酸鈉緩沖液(PH5.7)溶解凍干粉末
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色粉末,曲霉提取。分子量:15.4~16萬KDa(SDS-PAGE中約80KDa,等電點(diǎn)4.6)。一種能氧化葡萄糖生成葡萄糖酸的氧化還原酶。該酶需黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作為輔酶,每個(gè)分子中含兩個(gè)FAD。易溶于水,*不溶于乙迷、方、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等有機(jī)溶劑,50%丙同、66%的甲醇能使其沉淀。化學(xué)物質(zhì)EDTA、KCN、NaF不影響其酶活性,但酶活性受HgCL、AgCL(化銀)、苯肼、對汞苯甲酸等影響而使酶活性降低
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)該酶對β-D-葡萄糖表現(xiàn)很高的專一性。
〖保存〗:-20℃
脂肪酶(假絲酵母)
〖英文名稱〗:Lipase(Candida);Lipase from Candida;Microbial lipase
〖其他名稱〗:脂酶;脂肪水解酶;脂肪分解酵素;三?;视王;饷?;微生物脂肪酶
〖號〗:9001-62-1
〖級別〗:BR
分子量:一般在67000
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1活力:≥5000u/g
〖干燥失重〗:≤8.0%
溫度穩(wěn)定性:40度以下穩(wěn)定,超過50度將嚴(yán)重失活。短時(shí)間以40~42度為宜,長時(shí)間以38~40度為宜
PH穩(wěn)定性:以PH7.0~7.5為宜
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:灰褐色或淺灰色粉末。微生物菌種:解脂假絲酵母(cam licla lipo lytica)。屬脂肪加水分解酶類,和蛋酶、*并稱三大水解酶類。適溫度35~37℃。酶反應(yīng):甘油三酯+H2O=甘油二酯+脂肪
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