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更新時間:2017-06-04 21:54:05瀏覽次數(shù):90次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、成纖維細胞樣技術(shù)培訓、售后服務(wù),其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一13-14天的小鼠胚胎組織。2000年由*昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
成纖維細胞樣處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊?!蓟铩剑?le;3.0%
水溶液〖PH值〗:6-7
〖干燥失重〗:≤5.0%
磷酸鹽沉淀:無
堿性沉淀:無
細菌學:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:以動物組織為原料經(jīng)胰消化精制而成,淺黃色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)廣泛用于各類細菌培養(yǎng)基配制,亦可用做發(fā)酵培養(yǎng)基氮源
〖保存〗:RT
蛋胨(魚粉)
〖英文名稱〗:Peptone(Fish);Peptone F403
〖其他名稱〗:蛋胨(魚粉);魚粉蛋胨;F403蛋胨;蛋胨F403
〖號〗:91079-42-4
〖級別〗:FMB
一般檢測(溶解度、透明度、沉淀、色澤):符合
〖PH值〗(2%):4.5-7.0
總氮量:12-16%
〖干燥失重〗:≤7.0%
〖化物〗:≤3.5%
〖灼燒殘渣〗:≤10.0%
可凝性蛋:符合
眎類反應(yīng):符合
微生物試驗:符合
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:本品為魚類蛋質(zhì)之水解物,是黃色或紅棕色的干燥粉末與細粒的混合物,有特臭,無臭,不溶于乙醇、乙迷,易溶于水,極易吸潮。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用于細菌的培養(yǎng)、分離、〖鑒別〗。細菌培養(yǎng)基培制
〖保存〗:RT
多聚蛋胨
〖英文名稱〗:Polypeptone
〖其他名稱〗:多聚蛋胨;多價蛋胨
〖級別〗:FMB
總氮:>12.5%
氨基氮:>4.0%
成纖維細胞樣〖干燥失重〗:<6.0%
〖灼燒殘渣〗:<15.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:本品采用*的生物提取工藝精制而成,為淡黃色干燥粉末,營養(yǎng)豐富,可做多種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)提供細菌生長所需的生長因子,用于培養(yǎng)基原材料
〖保存〗:RT
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