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更新時間:2017-06-04 21:12:05瀏覽次數(shù):141次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、小鼠雜交瘤細胞;3B10技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;3B10
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠雜交瘤細胞;3B10處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖其他名稱〗:次甲基蘭;美藍;美蘭;*;品藍;亞甲基蘭;堿性藍9;四甲基藍;次甲基藍;亞甲蘭;堿性湖藍BB;堿性亞甲天藍;鹽基湖藍;鹽基湖藍BB;亞甲基天藍;3,7-雙(二甲氨基)吩噻嗪-5-翁〖化物〗;次甲基藍三水;次甲藍;甲稀藍;化-3,7-雙(二甲胺基)吩噻嚀-5-鎓;甲烯藍
〖號〗:7220-79-3
C16H18ClN3S?3H2O=373.90
〖級別〗:Reagent grade
〖含量〗Dye Content (Dry Basis):≥98%
〖干燥失重〗:≤15.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:發(fā)亮深綠色結(jié)晶或細小深褐色粉末,難溶于冷水及醇,加熱則易于溶解。帶有銅光澤,無氣味,在空氣中穩(wěn)定。1g溶于約25ml水、約65ml乙醇,溶液為天藍色,溶于方,不溶于乙迷和苯。水溶液遇〖鋅〗粉和稀硫酸能褪色,但暴露空氣中能恢復(fù),若加氨水則恢復(fù)更快。能與多數(shù)無機鹽生成復(fù)鹽,稍溶于酒精則呈藍色;遇濃硫酸呈黃光綠色;稀釋后呈藍色;水溶液中加入氫氧化鈉溶液后呈紫色或出現(xiàn)暗紫色沉淀。亞甲基藍指示劑還原態(tài)呈無色,氧化態(tài)呈藍色、性質(zhì)敏感。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)細菌染色劑;血清蛋生化檢驗時配混合指示劑;配制脫落細胞檢驗染色液;制備堿性美藍染色液;氧化還原指示劑;測定汞、錫。還原滴定劑,用以沉淀高酸鹽和錸酸鹽;光度測定硒和鉬
〖保存〗:RT
四溴酚蘭
〖英文名稱〗:TBPB;Tetrabromophenol blue;3,3',3'',4,5,5',5'',6-Octabromophenolsulfonphthalein;4,4'-(4,5,6,7-Tetrabromo-3H-2,1-benzoxathiol-3-ylidene)bis[2,6-dibromophenol] S,S-dioxide
〖其他名稱〗:四溴酚藍;四溴*蘭
〖號〗:4430-25-5
小鼠雜交瘤細胞;3B10C19H6Br8O5S=985.54
〖級別〗:IND
紅外光譜〖鑒別〗:合格
紫外光譜UV spectrometry:符合
PH變色域Transition interval:3.0(黃綠色) ~4.6(藍色)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或淺灰色或米黃色或粉紅色粉末,溶于水,〖熔點〗204℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:RT
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