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非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1操作步驟

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更新時間:2017-06-02 21:45:25瀏覽次數(shù):153次

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非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1操作步驟培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實驗操作過程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1操作步驟技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1操作步驟
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  CV-1細(xì)胞株源自成年雄性非洲綠猴的腎,用于Rous肉瘤病毒的轉(zhuǎn)染研究。  
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1操作步驟處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖英文名稱〗:dCTP,2Na;2′-Deoxycytidine-5′-triphosphate disodium salt
〖其他名稱〗:三磷酸脫氧胞苷鈉鹽
〖號〗:102783-51-7
C9H14N3Na2O13P3=511.12
〖級別〗:試劑級
純度:≥98.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
2′-脫氧鳥苷
〖英文名稱〗:2′-dG;2′-deoxyguanosine monohydrate;9-(2-Deoxy-beta-D-ribofuranosyl)guanine hydrate;Guanine-2'-deoxyriboside monohydrate
〖其他名稱〗:2′-脫氧鳥甙;2′-*脫氧核苷;9-β-2ˊ-呋喃脫氧核苷*;*脫氧核糖核苷;去氧鳥便嘌呤核苷;2'-去氧鳥甙
〖號〗:961-07-9
C10H13N5O4?H2O=285.26
〖級別〗:試劑級
〖含量〗:≥99.0%(HPLC)
水分:≤8%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色結(jié)晶粉末,溶于水,易被稀無機酸水解,如5% in 1N 氫氧化銨。〖熔點〗250℃。Em(252nm,Phosphate buffer,pH7.0):>13300
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
2′-脫氧鳥苷-5′-二磷酸三鈉鹽
〖英文名稱〗:2′-Deoxyguanosine-5′-diphosphate trisodium salt;dGDP 
〖號〗:102783-74-4
C10H12N5Na3O10P2=493.15
〖級別〗:分子生物學(xué)〖級別〗
純度:≥97.0%
水分:≤10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
2′-脫氧鳥苷-5′-三磷酸三鈉鹽
非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1操作步驟〖英文名稱〗:dGTP,3Na;2′-Deoxguanosine-5′-triphosphate trisodium salt;2'-Deoxyguanosine 5'-(tetrahydrogen triphosphate) trisodium salt
〖其他名稱〗:三磷酸脫氧鳥苷鈉鹽;2'-脫氧*核苷-5'-三磷酸;脫氧鳥苷三磷酸三鈉
〖號〗:93919-41-6
C10H13N5Na3O13P3?2H2O=609
〖級別〗:試劑級

 

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