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恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 FRhK4操作步驟

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更新時(shí)間:2017-06-02 21:36:23瀏覽次數(shù):146次

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恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]操作步驟培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實(shí)認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費(fèi)提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]操作步驟技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]操作步驟
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  FRhK-4細(xì)胞株來自300克重恒河猴正常雌性胚胎的腎組織。該細(xì)胞系是上皮細(xì)胞樣的連續(xù)細(xì)胞株,且已被數(shù)家實(shí)驗(yàn)室用作甲型肝炎研究。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C57
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]操作步驟處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。純度:≥98.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或類色干粉
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃
*鹽酸鹽
〖英文名稱〗:Guanine hydrochloride;6H-Purin-6-one;2-Aminohypoxanthine Hydrochloride 
〖其他名稱〗:鹽酸鳥糞素;鹽酸*;2-氨基-1,7-二氫-6H-嘌呤-6-酮單鹽酸鹽
〖號(hào)〗:635-39-2 
C5H5N5O?HCl=187.58
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥99.0%
〖熔點(diǎn)〗:≥300℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色針狀結(jié)晶或粉末。在100℃失去結(jié)晶水,在200℃失去化氫。溶于酸的水溶液,幾乎不溶于水、乙醇和乙迷。有刺激性
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:2~8℃
其它化學(xué)試劑
其它化學(xué)試劑
其它化學(xué)試劑
麥精
〖英文名稱〗:Malt extract;Maltine
〖其他名稱〗:麥芽浸汁;麥精
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]操作步驟〖號(hào)〗:8002-48-0
〖級(jí)別〗:試劑級(jí)
PH(6% water)@25℃:5.0~6.4
Total Nitrogen:≤2.0%
Standard plate count:≤5000/g
Coliform:≤10/g
Salmonella:None detected
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:采用新鮮麥芽經(jīng)特殊工藝處理,精制而成的膏狀物或液體,色澤橙黃或黃褐色。在冷水中大部分溶解,在熱水中易溶,溶液微帶混濁。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)配制細(xì)菌培養(yǎng)基。
〖保存〗:RT
無(wú)脂肪奶粉
〖英文名稱〗:Nonfat-Dried Milk;Non-Fat powdered milk
〖其他名稱〗:無(wú)脂肪奶粉
〖級(jí)別〗:試劑級(jí)

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