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猴胚胎腎上皮細(xì)胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-06-02 21:32:01瀏覽次數(shù):137次

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猴胚胎腎上皮細(xì)胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;實(shí)驗(yàn)方法培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實(shí)認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費(fèi)提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、猴胚胎腎上皮細(xì)胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 猴胚胎腎上皮細(xì)胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定


猴胚胎腎上皮細(xì)胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;實(shí)驗(yàn)方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過(guò)滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無(wú)菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖含量〗:≥98.0%(滴定法)
〖比旋光度〗:+11~+15°
〖干燥失重〗:≤2.0%
〖化物〗:合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.20%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或淡黃色結(jié)晶粉末。味苦、有異臭。易溶于乙醇、甲醇、丙同和乙酸,幾乎不溶于水、石油醚和苯?!既埸c(diǎn)〗:113℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
護(hù)肝素
〖英文名稱〗:CDCA;Chenodeoxycholic acid;3alpha,7alpha-Dihydroxy-5beta-cholanic acid;Chenodiol
〖其他名稱〗:脫氧鵝膽酸;鵝脫氧膽酸;3α,7α-二羥基膽質(zhì)酸;3α,7α-二羥基-5-β-膽烷酸;護(hù)肝素
〖號(hào)〗:474-25-9
C24H40O4=392.57
〖級(jí)別〗:試劑級(jí)
〖含量〗:≥98.0%(滴定法)
〖比旋光度〗:+11~+15°
〖干燥失重〗:≤2.0%
〖化物〗:合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.20%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或淡黃色結(jié)晶粉末。味苦、有異臭。易溶于乙醇、甲醇、丙同和乙酸,幾乎不溶于水、石油醚和苯?!既埸c(diǎn)〗:113℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
瓊脂
〖英文名稱〗:Agar;Gelose;2X YT Agar;Gum agar
〖其他名稱〗:瓊脂;洋菜;石花菜;瓊膠;寒天;凍粉;洋粉;洋菜粉;馬康奇氏培養(yǎng)基
〖號(hào)〗:9002-18-0
分子式:(C12H18O9)n
猴胚胎腎上皮細(xì)胞Marc-145懸浮適應(yīng)株;實(shí)驗(yàn)方法〖級(jí)別〗:BR
凝膠強(qiáng)度:≥1200/㎝2
水不溶物:≤1%
〖干燥失重〗:≤8.0%
〖灼燒殘?jiān)剑?le;1.0%
淀粉試驗(yàn):不顯藍(lán)
用量:5g/L
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:類色或淺黃色粉末。味淡或

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