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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實(shí)驗(yàn)方法

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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實(shí)驗(yàn)方法培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實(shí)認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費(fèi)提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性  上皮樣細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  Vero-HCV-NS5A細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能穩(wěn)定表達(dá)NS5A蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權(quán)限 A類
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實(shí)驗(yàn)方法處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。酸水解酪蛋
〖英文名稱〗:Casein acid hydrolysate;Casein hydrolysate pancreatic
〖其他名稱〗:酸水解酪蛋;酸水解干酪素
〖號〗:65072-00-6
〖級別〗:BR
總氮:≥8%
氨基氮:≥4%
〖化物〗:≤30%
灰份:≤40%
〖水份〗:≤5%
澄清度:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:以干酪素為原料,經(jīng)酸水解活性炭脫色處理精致而成的乳色至淺黃色粉末,極易吸濕。易溶于水,不溶于乙迷和甲醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)基用。提供細(xì)菌生長所需的生長因子
〖保存〗:RT
酸水解干酪素
〖英文名稱〗:Casein acid hydrolysate;Casein hydrolysate pancreatic
〖其他名稱〗:酸水解酪蛋;酸水解干酪素
〖號〗:65072-00-6
〖級別〗:BR
總氮:≥8%
氨基氮:≥4%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A實(shí)驗(yàn)方法〖化物〗:≤30%
灰份:≤40%
〖水份〗:≤5%
澄清度:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:以干酪素為原料,經(jīng)酸水解活性炭脫色處理精致而成的乳色至淺黃色粉末,極易吸濕。易溶于水,不溶于乙迷和甲醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)基用。提供細(xì)菌生長所需的生長因子
〖保存〗:RT
酪蛋水解物
〖英文名稱〗:Casamino acid
〖其他名稱〗:酪蛋水解物
〖級別〗:BR
Total nitrogen:≥8.7%
Amino nitrogen:≥5.3%
Moisture:≤4.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:色或黃色粉末,極易吸濕。易溶于堿性水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)配制培養(yǎng)基用

 

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