在做大鼠elisa免疫檢測試劑盒實(shí)驗中，相信大家或多或少難免會出現(xiàn)一些狀況，就在上周五，小編就在貼吧看到有個吧友發(fā)帖問在做ELISA實(shí)驗，到顯色步驟結(jié)束后，酶標(biāo)板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。那么今天上海勁馬請咱技術(shù)人員給大家分析分析
原因分析：試劑已過有效期，或不同試劑盒組分混用，檢查試劑的組分及批號，確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對應(yīng)的試劑盒。
對策：不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。
整板的黃板現(xiàn)象可能是由于錯加其他試劑造成，如同時操作兩對半試劑時，測HbsAb板用于測HBsAg等；實(shí)驗前檢查試劑的組分及批號，確認(rèn)所有組分均屬于對應(yīng)的試劑盒。如盛標(biāo)本的試管四周常有血痂，易脫落，應(yīng)遠(yuǎn)離酶標(biāo)板。
      elisa試劑盒超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號；試劑盒沒有按規(guī)定進(jìn)行留存，受高溫影響；實(shí)驗前檢查試劑的組分及批號，確認(rèn)試劑未過期。孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃，孵育時間嚴(yán)格按照說明書操作，保溫期內(nèi)不宜多開門，以免影響保溫?；ò?，一般是由于臨床標(biāo)本的收集、處理和留存方法不當(dāng)造成，放置時間(自然放置1~2h)及離心轉(zhuǎn)(3000r/min)、離心時間(15min)應(yīng)引起注意。
    試劑、樣品用前未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡，20分鐘左右。錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴(yán)格按說明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現(xiàn)象。實(shí)驗結(jié)束后，陰陽性對照正常，質(zhì)控正常，但臨床標(biāo)本感覺顯色較弱，待測標(biāo)本中可能不含強(qiáng)陽性標(biāo)本，故結(jié)果可能是正常的，如有懷疑，可復(fù)檢標(biāo)本加入疊氮鈉作為防腐劑，酶免實(shí)驗中的標(biāo)本禁用疊氮鈉作為防腐劑，可選用 proclin、硫柳汞等其他防腐劑，陰陽性對照正常，但質(zhì)控、參考品或個別弱陽性標(biāo)本未能檢出。
大鼠elisa免疫檢測試劑盒洗板及加樣過程中，酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力，確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈。加樣時交叉污染；加標(biāo)本時盡量 避免交叉污染。 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記β-肌動蛋白（） 人內(nèi)*肽-2(EM-2)

 辣根過氧化物酶標(biāo)記白介素6(人)IgG 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)

 辣根過氧化物酶標(biāo)記肝細(xì)胞生長因子受體(原癌基因蛋白)IgG 人內(nèi)毒素(ET)

 辣根過氧化物酶標(biāo)記聚*/抗His tag標(biāo)簽（C端）IgG 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白IgG 人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗布魯氏菌IgG 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗腸致病性大腸桿菌IgG 人膜攻擊復(fù)合物(MAC) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希桿菌O6IgG 人膜輔蛋白(MCP/CD46) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157IgG 人膜表面免疫球蛋白(SmIg) 
大鼠elisa免疫檢測試劑盒