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大鼠 8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA Kit

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產(chǎn)品型號48T/96T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-12-20 10:34:31瀏覽次數(shù):918次

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大鼠 8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA Kit具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點。公司產(chǎn)品品種齊全,質(zhì)量可靠,擁有完善的售前 售中 售后服務體系。
公司提供ELISA Kit為我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關標準進行,并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品名稱供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。
產(chǎn)品名稱大鼠 8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA Kit
英文名稱Rat 8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit
貨號SY-R9630
大鼠 8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA Kit Rat 8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit
【實驗用途】8-OHdG, 8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG),8-OHdG是DNA氧化損傷的特異產(chǎn)物,是*的內(nèi)源性及外源性因素對DNA氧化損傷的生物標志物。8-OHdG是DNA氧化損傷的主要產(chǎn)物之一。在復制過程中,DNA鏈上8-OHdG可以與C以外的其它堿基配對形成點突變,其中GC→TA突變的發(fā)生已為大量研究所證實,并被認為是氧化應激因素致癌、致突變的主要機理之一。機體修復機制正常時,8-OHdG可以在hOGG1等酶的作用下從DNA鏈上切除并重新?lián)饺胝5镍B嘌呤堿基,而切下的8-OHdG則可入血經(jīng)尿液排出體外。8-OHdG在體內(nèi)穩(wěn)定存在,一旦形成不再被機體進一步代謝,尿中8-OHdG含量與細胞內(nèi)DNA氧化損傷程度相關。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
 
實驗前預備:
1、使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37℃溶解。
2、標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為 10,000pg/mL(貯液)。先將其稀釋為5,0000pg/mL(標準曲線濃度)后,再準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入500μL的標準品稀釋液,依次倍比稀釋成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3、檢測溶液A及檢測溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。臨用前分別以檢測稀釋液 A 或 B1:100 稀釋(如:10μL 檢測溶液 A/990μL 檢測稀釋液 A),充分混勻,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μL/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2mL。
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。 
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。

操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

ADAR1 (N-terminus) 英文名稱: 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(N端)  0.2ml
AMPK alpha 2 英文名稱: 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體  0.1ml
ADK 英文名稱: 腺苷酸激酶抗體  0.1ml
A2ML1 英文名稱: α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1  0.1ml
3-Apr 英文名稱: 細胞凋亡相關蛋白3抗體  0.1ml
Actin 英文名稱: 肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體  0.1ml
ABCB7 英文名稱: ATP結(jié)合蛋白家族7抗體  0.2ml
ASCL2 英文名稱: ASCL2蛋白抗體  0.2ml
phospho-Ataxin 1(Ser775) 英文名稱: 磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體  0.1ml
phospho-ATF1 (Ser63) 英文名稱: 磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體  0.1ml
phospho-ATF2 (Ser480) 英文名稱: 磷酸化活化復制因子2抗體  0.1ml
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53) 英文名稱: 磷酸化活化復制因子2抗體  0.1ml
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51) 英文名稱: 磷酸化活化復制因子2抗體  0.1ml
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55) 英文名稱: 磷酸化活化復制因子2抗體  0.1ml
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53) 英文名稱: 磷酸化活化復制因子2抗體  0.1ml
phospho-ATF2(Thr71) 英文名稱: 磷酸化活化復制因子2抗體  0.1ml
ATF5 英文名稱: 活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體  0.2ml
ATF6 beta 英文名稱: 活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體  0.2ml
ATIC 英文名稱: AICAR甲?;D(zhuǎn)移酶抗體  0.2ml
phospho-ATM (Ser794) 英文名稱: 磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體  0.1ml
ATP5E 英文名稱: ATP5E蛋白抗體  0.2ml

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