參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用RT-PCR試劑盒

產(chǎn)品貨號：YS-P013461

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

特點優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐

的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

大鼠質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)燒堿石棉(CP,20-30目)磷酸化真核延伸因子激酶2抗體

大鼠質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9) 燒堿石棉(CP，10-20目)纖連蛋白4抗體

大鼠血管生成素(ANG)磷酸三丁酯(AR,99%)延伸因子結(jié)合蛋白EFTUD2抗體

大鼠促血管生成素1(ANG1)磷酸三丁酯(CP)表皮生長因子樣蛋白6抗體

大鼠二級淋巴組織趨化因子(SLC)磷酸三丁酯(標準品)磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體

大鼠金屬硫蛋白1(MT1)皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低性溶劑)核苷轉(zhuǎn)運蛋白ENT1抗體

大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高性溶劑)核苷轉(zhuǎn)運蛋白ENT2抗體

大鼠化酶(Methylase)活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)鳥嘌呤核苷酸交換因子4

大鼠微量蛋白(mALB)活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色)磷酸化紅膜條帶4.1蛋白抗體

大鼠單核趨化蛋白1(MCP-1)活性炭顆粒(AR,20-50目)磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體

大鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)活性炭(電鍍脫色,200目,from wood)蛋白激酶受體B1+B2抗體

大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3)活性炭(催化劑載體,8-16目)磷酸化神經(jīng)鳥苷酸置換因子Ephexin1抗體

大鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)活性炭(凈水、氣體純化,棒,φ1.0mm)磷酸化Ephrin B抗體

大鼠Smad同源物1(Smad1)活性炭(凈水、氣體純化,10-24目)惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體

大鼠Smad同源物4(Smad4)活性炭(電鍍脫色,40-60目,from Nutshell)磷酸化紅生成素受體抗體

大鼠胃動素(MTL)活性炭(凈水、氣體純化,棒,φ4.0mm)磷酸化HER2受體抗體
豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用RT-PCR試劑盒MMP-14  質(zhì)金屬蛋白酶-14抗體雷公藤內(nèi)酯  分析標準品，98%

MMP-15  質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體2-過氧化丁酮 >52%(GC)

MMP-16  質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體2-過氧化丁酮 CP

MMP-20  質(zhì)金屬蛋白酶20抗體丁酸酐 98%

MMP-17  質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體鄰 99%

MMP-24  質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體鄰 分析標準品，99.5%

MMP-26  質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體3,5-二酚 98%

MMP-10  質(zhì)金屬蛋白酶-10抗體獨石氧化鈮 電子級99.98%