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寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-20 15:47:34瀏覽次數(shù):120次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013527
品牌 YSRIBIO
寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

QQ截圖20191211135002.jpg
服務流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

YS-P013527

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

豬碳酸酐酶II(CA2)4,7-二羥-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC))β半乳糖苷酶1樣蛋白3抗體

豬角膜蛋白(KERA)5--1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))糖皮質激素誘導轉錄蛋白1抗體

TU3A蛋白(TU3A)1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))腦膠質瘤發(fā)病相關蛋白2抗體

豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)TPP(=四卟啉)神經(jīng)節(jié)苷脂誘導分化相關蛋白1抗體

豬硫酸皮膚素(DS)  TMPyP[=α,β,γ,δ-四(1-吡啶嗡-4-)卟吩對磺酸鹽](>98.0%(N))G蛋白偶聯(lián)受體18抗體

豬蛋白酶激活受體1(PAR1)TCPP[=四(4-羧)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))G蛋白偶聯(lián)受體119抗體

豬反狀腺原氨酸(rT3) 5,10,15,20-四(4-吡啶)卟啉(>97.0%(N))G蛋白偶聯(lián)受體88抗體

豬蛋白酪氨酸磷酸酶受體N(PTPRN)8-巰喹啉鹽酸鹽(>95.0%(T))G蛋白偶聯(lián)受體125抗體

豬補體成分5(C5)偶氮堿H(>97.0%(T))谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/谷氨酸受體6抗體

豬對氧磷酶1(PON1) 縮氨-2-硫酚(>98.0%(HPLC)(N))谷氨酸受體紅藻氨酸離子3/谷氨酸受體7抗體

β-促脂素(β-LPH) N-糠酰羥肟酸(>99.0%(HPLC))谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/3抗體

豬成纖維生長因子受體2(FGFR2) 2,2'-二辛可寧酸二鹽水合物(>98.0%(HPLC))離子型谷氨酸受體4抗體

V-Myc骨髓瘤病癌因同源物(MYC)氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))磷酸化離子型谷氨酸受體4抗體

豬纖調蛋白(FMOD) N-肉桂酰-N-(2,3-二)羥(>98.0%(HPLC)(N))代謝型谷氨酸受體1A抗體

豬胸苷酸合成酶(TS/TYMS)5,6-二-3-(2-吡啶)-1,2,4-三(>98.0%(HPLC)(T))周期蛋白依賴性激酶調節(jié)亞2抗體

豬鞘脂激活蛋白原(PSAP)α-聯(lián)呋喃酰二肟(>97.0%(W))β腎上腺素能受體激酶2抗體
寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒PSAP/PAP (human)  前列腺酸性磷酸酶抗體(人)3-氨-4-氧-N-酰 98%

PSCA   前列腺干抗原抗體鄰氧 GR,99%

PSD93  突觸后密度蛋白93抗體2-氨-4-硝 98%

Phospho-PSD93 (Tyr340)  磷酸化突觸后密度蛋白93抗體2-氨-4-硝 分析標準品

PSD95  突觸后密度蛋白95抗體對氧 AR,99.0%

Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240)  磷酸化突觸后密度蛋白95抗體4-氯-2- 99%

PSGL-1/CD162  P選擇素糖蛋白配體1抗體對氯 98%

PSMD9  蛋白酶調解因子92,5-二氯 98%

 


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