服務(wù)流程：

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

綿羊免疫球蛋白G(IgG)熒光素Cy3標(biāo)記猴IgG

熒光素Cy3標(biāo)記猴IgM

犬單核趨化蛋白1(MCP-1)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記小鼠IgM

犬白介素8(IL-8)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記豬IgG

犬γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記水貂IgG

犬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記兔IgM

犬白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記大鼠IgM

犬白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記重組人白介素-1受體拮抗劑

犬腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記血藍蛋白

犬血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記雞卵白蛋白

犬纖維蛋白原(Fbg) 酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記人血白蛋白

犬脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)熒光素Cy3標(biāo)記胰糜蛋白酶

犬補體因子3(C3)酶聯(lián)免疫試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)

犬轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對照)

犬結(jié)合珠蛋白(HP)酶聯(lián)免疫試劑盒熒光素PE-Cy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)

犬絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝A成員1(SERPINA1)酶聯(lián)免疫試劑盒辣根過氧化物酶標(biāo)記生物素
登革熱病毒檢測試劑盒(PCR熔解曲線法)GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2)  γ1氨丁酸A型受體B2抗原3-丁炔-2-酮 97%

GAD-67 (glutamate decarboxylase 67)  谷氨酸脫羧酶-67抗原3-溴-2-烯 95%

GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153)  生長抑制DNA損傷因153抗原N-Boc-1,6-二氨己烷 97%

phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 )  磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗原6-溴喹啉 96%

GAPDH  3-磷酸甘油脫氫酶(人)抗原4-溴吡啶鹽酸鹽 98%

CXCR3/CD183 peptide  表面趨化因子受體3抗原3-溴 98%

GATA-3(GATA binding factor 3)  GATA結(jié)合蛋白3抗原4,4'-聯(lián)吡啶 98%

GATA-4(GATA binding factor 4)  GATA結(jié)合蛋白4抗原N,O-雙(硅烷)三氟 96%
反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。