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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)

輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-20 19:58:49瀏覽次數(shù):94次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013873
品牌 YSRIBIO
輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

YS-P013873

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

豚鼠囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(CFTR)二二(>99.0%(GC))環(huán)指蛋白94抗體

豚鼠巨噬炎性蛋白5(MIP-5)2,6-二異萘(>99.0%(GC))血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體

豚鼠碳酸酐酶I(CA1)熒蒽(>98.0%(GC))腺泡狀軟組織肉瘤結(jié)構(gòu)域蛋白ASPC抗體

豚鼠間隙連接蛋白(Cx) 十六碳酰(>95.0%(GC))G蛋白偶聯(lián)誘導(dǎo)蛋白2受體抗體

豚鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)3-羥-2-萘酸酯(>99.0%(GC))腫瘤壞死因子C/淋巴素β抗體

豚鼠C-肽(C-P)油酸酰(>65.0%(GC))狀腺受體相互作用蛋白1抗體

豚鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)正辛酰(>98.0%(GC)(N))轉(zhuǎn)化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1抗體

豚鼠生長分化因子2(GDF2)硬脂酰(>90.0%(GC))腫瘤相關(guān)抗原L6抗體

豚鼠脯氨酸/精氨酸豐富端亮氨酸豐富重復(fù)蛋白(PRELP)硬脂酰(>95.0%(T))跨膜蛋白59抗體

豚鼠煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)丁鄰二酰羥酸丁酯(>95.0%(GC))神經(jīng)元蛋白22抗體

豚鼠半乳凝集素4(GAL4)鄰二酸芐酯2-己酯(>95.0%(GC))味覺受體蛋白家族2亞60抗體

豚鼠抗膠原蛋白抗體(CLA) 鄰二酸芐異壬酯 (支鏈異構(gòu)體混合物骨架結(jié)合蛋白2抗體

豚鼠去腎上腺素(NA/NE) 間二酸雙(2-己)酯(>98.0%(GC))TUB蛋白抗體

豚鼠周期素依賴性激酶2(CDK2) 鄰二酸雙十一烷酯(支鏈異構(gòu)體類的混和物)(>98.0%(T))轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體

豚鼠氨酸羥化酶 (PAH)鄰二酸酯(>93.0%(GC))跨膜蛋白9家族成員4抗體

豚鼠主要穹窿蛋白(MVP)鄰二酸二異丁酯(>98.0%(GC))共濟失調(diào)毛細血管擴張癥D相關(guān)蛋白抗體
輪狀病毒A組檢測試劑盒(熒光PCR法)Nociceptin/FITC  熒光素標(biāo)記孤菲肽/痛敏肽抗體IgG2,6-吡啶二羧酸 99%

Nociceptin receptor/FITC  熒光素標(biāo)記孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體IgG聚四氟烯微粉 平均粒徑: 5μm

NMP22/FITC  熒光素標(biāo)記核質(zhì)蛋白22抗體IgG葡萄糖 AR

Nogo-A/NEP /FITC  熒光素標(biāo)記軸索過度生長抑制因子-A抗體IgG甘露 AR,98.0%

Nogo-B/A /FITC  熒光素標(biāo)記軸索過度生長抑制因子-B/A抗體IgG甘露  超純級,≥99.0%(HPLC)

Nogo R/NGR /FITC  熒光素標(biāo)記軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體IgG甘露 ≥99.9999% metals basis

Nitric oxide/NO/FITC  熒光素標(biāo)記一氧化氮抗體IgG甘露 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.9999%

NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS /FITC  熒光素標(biāo)記一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)IgG甘露  藥用級,符合EP, FCC, USP
反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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