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脊髓灰質(zhì)炎病毒3型檢測試劑盒(熒光PCR法)

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-20 19:58:10瀏覽次數(shù):130次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013870
品牌 YSRIBIO
脊髓灰質(zhì)炎病毒3型檢測試劑盒(熒光PCR法)原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

QQ截圖20191211135002.jpg
服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

脊髓灰質(zhì)炎病毒3型檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

YS-P013870

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

豚鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9) 二氧二硅烷(>97.0%(GC))環(huán)指蛋白9抗體

豚鼠色素上皮衍生因子(PEDF)癸三氯硅烷(>94.0%(GC))金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(C端)

豚鼠降鈣素因相關(guān)肽(CGRP) 十二烷三氯硅烷(>97.0%(T))表達蛋白19A抗體

豚鼠白介素1β(IL-1β)十二烷三氧硅烷(>93.0%(GC))酸敏感性離子通道蛋白抗體

豚鼠表皮生長因子(EGF)二酰氧二硅烷(>97.0%(GC)(T))胸腺質(zhì)淋巴生成素-1抗體

豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)二氧二硅烷(>98.0%(GC))骨架相關(guān)蛋白2抗體

豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(NOS3/eNOS) 二氧硅烷(>98.0%(GC))轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(IFABP)三氧硅烷(>95.0%(GC))腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8

豚鼠γ干擾素(IFN-γ)三氯己硅烷(>97.0%(GC))轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體

豚鼠免疫球蛋白G1(IgG1)己氧硅烷(>96.0%(GC))扭轉(zhuǎn)蛋白B抗體

豚鼠免疫球蛋白G2α(IgG2α)十六烷氧硅烷(>85.0%(GC))巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白8抗體

豚鼠糖化磷脂酰肌特異性磷脂酶D1(GPLD1)三氯()硅烷(>98.0%(GC)(T))味覺受體蛋白家族2亞7抗體

豚鼠組織蛋白酶D(CTSD)  三氧硅烷(>98.0%(GC))味覺受體蛋白家族2亞50抗體

豚鼠遲現(xiàn)抗原(VLA) 氧()硅烷(>98.0%(GC))扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1抗體

豚鼠胃動蛋白2(GKN2)三氯十八烷硅烷(>85.0%(GC))Tuftsin蛋白抗體

豚鼠端粒酶(TE)十八烷三氧硅烷(>85.0%(GC))跨膜蛋白161A抗體
脊髓灰質(zhì)炎病毒3型檢測試劑盒(熒光PCR法)NHE1/FITC  熒光素標記鈉氫通道蛋白抗體IgG并噻吩 97%

NIK/FITC  熒光素標記NFkB誘導(dǎo)的激酶抗體IgG二并噻吩 99%

NIPP1/ARD1/FITC  熒光素標記核抑制蛋白磷酸酶1抗體IgG二并噻吩 98%

NIS/FITC  熒光素標記鈉轉(zhuǎn)運體蛋白抗體IgG二并噻吩 分析標準品

NIT2/FITC  熒光素標記抗NIT2蛋白抗體IgG1,3-二氯酮 99%(劇品)

NKA/FITC  熒光素標記神經(jīng)激肽A抗體IgG1,2-二硫 97%

NK-1/Substance P Receptor /FITC  熒光素標記P物質(zhì)受體抗體IgG3-噻吩 98%

NK-2R/FITC  熒光素標記神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體IgG碳酸鈣 AR,99%

 


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