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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次柯薩奇病毒B6檢測試劑盒(熒光PCR法)

柯薩奇病毒B6檢測試劑盒(熒光PCR法)

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產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-20 19:54:44瀏覽次數(shù):109次

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規(guī)格 50次 貨號 YS-P013856
品牌 YSRIBIO
柯薩奇病毒B6檢測試劑盒(熒光PCR法)原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
服務流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

柯薩奇病毒B6檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

YS-P013856

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截圖20191211135002.jpg 

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

N-酰β-D-氨葡萄糖苷酶(NAGase)2,2-雙(4-酰氧)烷(>98.0%(GC))絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶TNN13K抗體

兔核孔蛋白37kda(NUP37)2,2-雙(4-氯酰氧)烷(>97.0%(GC)(T))環(huán)指蛋白16抗體

BCL2相關死亡促進因子因子(BAD) 2,2-雙(4-羥-3,5-二)烷(>98.0%(GC))胸腺五肽抗體

XIII型膠原 (COL13)2,2-雙[4-(4-氨氧)]烷(>98.0%(HPLC)(T))白介素1受體銜接蛋白抗體

兔狀腺球蛋白(TG)α,α'-雙(4-氨)-1,4-二異(>98.0%(GC))磷酸化白介素1受體銜接蛋白抗體

兔組氨酸豐富糖蛋白(HRG) α,α'-雙(4-羥)-1,4-二異(>98.0%(GC))腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2抗體

兔線粒體脫氫酶(ALDM) 雙酚 C(>98.0%(GC))癌抗雌激素抵抗蛋白2抗體

兔促生長激素(GH)2,2-雙(4-環(huán)氧氧)烷(>85.0%(GC))凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體

兔平足蛋白(PDPN)α,α'-雙(4-羥-3,5-二)-1,4-二異(>98.0%(GC))腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體

兔化酶(Methylase)2,2-雙(3-環(huán)己-4-羥)烷(>98.0%(HPLC))腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體

兔纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP) 2,2-雙(2-羥-5-聯(lián))烷(>98.0%(HPLC))神經(jīng)干抑制相關蛋白TRIM32抗體

兔腫瘤壞死因子β(TNF-β)2,2-雙(4-羥-3-異)烷(>98.0%(GC))抗體

GATA結合蛋白1(GATA1)4,4'-異亞二氧酸(>98.0%(HPLC)(T))速激肽受體3抗體

兔磷酸肌-3-激酶催化亞σ肽(PIK3Cσ)4,4'-異亞二酚二烯酸酯(>98.0%(GC))凋亡相關蛋白5抗體

兔調(diào)節(jié)正常T表達和分泌因子(RANTES) 四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))微管蛋白γ/Tubulin γ抗體

Bcl2同源拮抗劑1(BAK1)四溴雙酚A雙(2-羥)(>93.0%(GC))血管生成素受體1抗體
柯薩奇病毒B6檢測試劑盒(熒光PCR法)CITED1/ABCC1/FITC  熒光素標記結合轉化激活因子CITED1抗體IgG1,4-哌二磺酸(PIPES) for cell culture, ≥99%

MRP2/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白2抗體1,4-哌二磺酸 99.5%

MRP3/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白3抗體IgG哌-N,N-雙(2-羥烷磺酸) 99%

MRP4/ABCC4 /FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白4抗體IgG馬啉磺酸  99%

MRP5/ABCC5/FITC  熒光素標記多藥耐藥相關蛋白5抗體IgG1,4-哌二磺酸單鈉 99%

MrpL28 /FITC  熒光素標記線粒體核糖體蛋白L28抗體IgG1,4-哌二磺酸二鈉鹽 BC

 Alpha-MSH/POMC /FITC  熒光素標記α黑素激素/阿黑皮素原抗體IgG1,4-哌二磺酸倍半鈉鹽 99%

MSH-2/FITC  熒光素標記錯配修復蛋白2抗體IgG1,4-哌二磺酸二鹽 BC


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