特點(diǎn)優(yōu)勢：

1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐

的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：柯薩奇病毒B5型檢測試劑盒（熒光PCR法）
產(chǎn)品貨號：YS-P013855

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。

實(shí)驗(yàn)過程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：

一、樣品采集：

1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。

2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。

3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

兔骺蛋白聚糖(EPYC)  雙(3-氨)砜(>98.0%(T))狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體

兔半乳凝集素3(GAL3)4,4'-二氯二砜(>98.0%(GC))微管蛋白α/Tubulin α抗體

兔脂肪酶H (LIPH)雙[3,5-二溴-4-(2-羥氧)]砜(>96.0%(GC))狀腺素T3抗體

兔α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)雙(4-羥-3,5-二)砜(>98.0%(HPLC)(T))腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體

兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽B受體(CCKBR) 雙[4-(2-羥氧)]砜(>97.0%(GC))促狀腺素受體抗體（N端）

兔B淋巴瘤因子2(Bcl-2)雙[4-(3-氨氧)]砜(>98.0%(HPLC)(T))狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體

兔S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13 )雙[4-(4-氨氧)]砜(>98.0%(HPLC)(T))轉(zhuǎn)鈷素蛋白2抗體

兔視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(PRB) 雙(4-氟-3-)亞砜(>98.0%(GC))跨膜蛋白74抗體

兔生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白(GHITM)雙(4-氟)砜(>99.0%(GC))轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2抗體

兔孕激素/孕酮(Pg)二砜-3,3'-二磺酸二鈉鹽(>95.0%(T))腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體

兔胸腺依賴性抗原(TD-Ag)雙(4-)砜(>98.0%(N))Toll樣受體8抗體

兔黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)  3,3',4,4'-二砜四羧酸二酸酐(>97.0%(HPLC)(T))胸腺素抗體

兔脂肪酸去飽和酶2 (FADS2)二砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))α微管蛋白酰轉(zhuǎn)移酶1抗體

兔抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1) 3,7-二氨-2,8-二二并噻吩砜(含2,6-二異構(gòu)體)(>70.0%(HPLC))TANC1蛋白抗體

兔衰老關(guān)鍵蛋白5(FBLN5)2,2-雙(4-羥)丁烷(>98.0%(GC))遺傳性耳聾β-tectorin抗體

兔泛素連接酶E3A (UBE3A)  2,2'-雙(4-氧)烷(>98.0%(N))谷氨酰轉(zhuǎn)酶2抗體
柯薩奇病毒B5型檢測試劑盒（熒光PCR法）MPO /FITC  熒光素標(biāo)記髓過氧化物酶抗體IgG嗎啉磺酸半鈉鹽 BC

HAVCR1/KIM1/TIM1/FITC  熒光素標(biāo)記型肝炎病受體1IgG3-(N-啉)磺酸半鈉鹽 BC，生化試劑級

HSD11B2/HSD2 /FITC  熒光素標(biāo)記羥類固脫氫酶11β2抗體IgG3-嗎啉-2-羥磺酸鈉 99%

MR/FITC  熒光素標(biāo)記鹽皮質(zhì)激素受體抗體IgGN'N-二(4-磺丁)-3,5-二二鈉鹽 97%

MRAS/Mras/FITC  熒光素標(biāo)記原癌因M-ras抗體IgGN--N-（2-羥-3-磺）-3'5-二鈉鹽 99%

Mre11/HNGS1/FITC  熒光素標(biāo)記DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgG二十八烷[3-氧硅]氯化銨 65%

Phospho-Mre11 (Ser676)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgG1,4-哌二磺酸 99%

MRP1/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體IgG1,4-哌二磺酸(PIPES) for molecular biology,≥99.5% (T)